培养两天后,用GUS染色液对玉米幼胚进行染色,再放置37摄氏度水浴锅内24小时后取出,即可得出GUS的瞬时表达率,瞬时表达率=有GUS表达的幼胚数量/总幼胚数量。瞬时表达率可以得出玉米共培养阶段的最适条件[7]。

2。4。2 共培养温度

共培养的温度对共培养这一阶段的玉米幼胚的生长是至关重要的,本实验对温度进行了四个梯度的实验,温度分别设置为20、22、24、26四个梯度进行试验。培养基的成分和pH不需要改变,做12个培养皿,每个里面放已经处理好的大小控制在1。5mm左右的幼胚30个,封口,标记结束后,放到4个不同温度其余条件都相同的恒温培养箱内共培养2天,两天后取出,对幼胚的生长状态和GUS的表达进行比较,从而得出较适宜的培养温度。

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