甜菊糖苷是高达三十倍蔗糖甜度的非热量甜剂,这使得它们成为食品工业的有吸引力的糖代用品。它被广泛地称为“世界糖的第三个来源”。大量的医学实验表明,甜菊糖苷是无害的,非致癌性的,安全的,道如蔗糖。其安全性已经得到国际组织FAO和WHO等的认可。我国卫生部自1985年和1990年分别批准了甜菊糖苷为不限量使用的纯天然甜添加剂和医药用的甜剂辅料。甜菊糖苷是一类具甜的萜烯类配糖体,为白色粉末。其中stv成分占60%~70%,甜度为蔗糖的300倍,莱宝迪苷A(RA)占15%~20%,甜度为蔗糖的450倍。而莱宝迪苷B(RB),莱宝迪苷C(RC)和莱宝迪苷D(RD)是从Stevia rebaudiana(Bert.)Bertoni的叶片中分离的次要成分。RB的道比蔗糖甜约150倍;RC的道比蔗糖甜约20-30倍,RD的道比蔗糖甜约200-220倍,而且都是非热量的。
 Trivial name    R1    R2    R3    R4    Formula    massc    refd
Stevioside    Glcβ1−    Glcβ(1−2)Glcβ1−    H2    H    C38H60O18    804.38    58
—    Glcβ(1−2)Glcβ1−    Glcβ1−    H2    H    C38H60O18    804.38    82
Rebaudioside A    Glcβ1−    Glcβ(1−2)[Glcβ(1−3)]Glcβ1−    H2    H    C44H70O23    966.43    70
Rebaudioside B    H    Glcβ(1−2)[Glcβ(1−3)]Glcβ1−    H2    H    C38H60O18    804.38    70
Rebaudioside C    Glcβ1−    Rhaα(1−2)[Glcβ(1−3)]Glcβ1−    H2    H    C44H70O22    950.44    88
Rebaudioside D    Glcβ(1−2)Glcβ1−    Glcβ(1−2)[Glcβ(1−3)]Glcβ1−    H2    H    C50H80O28    1128.48    86
这些糖苷具有不同的质和甜度,它们具有相似的苷元,其结构与分子极性都非常相近,很难用常规方法分离鉴别。目前常用的定性分析的方法主要有高效液相色谱法、毛细管电泳法、超临界萃取法等,但实验设备要求高,实验过程比较繁琐。薄层色谱法(Thin Layer Chromatography,TLC)是一项设备精简、操作便捷、专属性很强、费用低廉的分离方法。TLC法自问世后,几十年以来在各个方面都得到了广泛的认可与应用,在化学的定性鉴别更是一项重要的分析手段。薄层色谱快速鉴别方法为采用规范化展开溶剂系统和简单的实验条件所进行的通用性薄层色谱鉴别方法 ,可广泛用于检验单位现场进行植株品种是否优良的快速鉴别。而且RD作为一种鉴别甜叶菊品种优良性的特征物质,并没有RD的薄层鉴别并没有研究。本文在甜菊糖苷类薄层色谱鉴别基础上,试验筛选出S. rebaudiana中RD的最佳薄层色谱条件,为鉴别RD品种提供鉴定依据。
1试剂与材料
1.1试剂
   正丁醇,乙醚,乙酸,硼酸,无水乙醇,羧甲基纤文素钠,氯仿,甲醇,硫酸;所有试剂均为分析纯。水为超纯水。
1.2 材料
   本实验所用材料从江浦农场甜叶菊扦插种苗基地收集,经鉴定为菊科植物甜叶菊(S. rebaudiana),甜叶菊糖苷标准品(RA,RB,RC,RD,STV),葡萄糖麦芽糖混合标品,薄层色谱用硅胶(化学纯),Waters 2487 PDA紫外可见光检测器,JA2003B型电子天平(山海经越平科学仪器有限公司),实验室玻璃仪器
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高RA甜叶菊辅助选择育种EST-SSR分子标记开发

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