四种外生菌根真菌对黑松吸收转运镉的影响(3)
表1 供试土壤的理化性质
Table 1 Physical and chemical properties of tested soils
性质 平均值±标准差
pH (CaCl2) 6.24 ± 0.08
含水率（%） 8.96 ± 0.05
有机质（%） 0.34 ± 0.02
N (mg kg-1) 40.12 ± 1.19
P (mg kg-1) 50.31 ± 1.01
Cd (mg kg-1) L.O.D.
1.4 试验设计
50 mL离心管锯掉管底尖头部分，在管口包裹两层42 µm滤膜（只允许菌丝透过，植物根系不能透过），将菌根化和非菌根化黑松分别种植到这些离心管中，每管中添加25 g风干的过10目筛的灭菌火山灰。每种黑松各准备45管，此外。每种随机选取9管，在滤膜外套上离心管盖，作为封闭管。未盖离心管盖的作为开放管。
准备45个花盆（底径65 mm，口径105 mm，容积500 mL），分别在每盆中装入250 g Cd污染土（30，75，150 mg kg-1)，每种浓度准备15盆。此外，准备30盆不添加Cd的上述火山灰。
每种黑松随机选择3根开放管垂直插入上述装有不同浓度Cd的火山灰花盆中，埋入深度< 5 mm，每种接菌处理每种浓度准备3盆，此外，每种黑松（4种接菌和不接菌）的封闭管组也按同样的方法准备3盆，盆中基质为不添加Cd的火山灰。
试验在阳光房中进行，自然光照，温度控制为25 ℃/20 ℃，相对湿度控制55 %，处理5个月。
1.5 测定指标及方法
处理5个月后，取样。将黑松从离心管中取出，用去离子水洗净表面土壤，分为地上部分和地下部分，分别在85 ℃烘箱中烘干至恒重后测定生物量。离心管中的土样取出后放入信封中烘干，用玛瑙研钵研磨后过100目筛，然后继续烘干至恒重。
此外分别测定地上部分和地下部分中的Cd含量以及P、K、Mg、Fe的含量。具体方法：将烘干的植物样放入洁净的消煮管中，加入5 mL混酸（VHNO3 : VHClO4 = 87:13），消煮完全后加入5 mL 2.5% HNO3，使用ICP-OES测定样品中的Cd、P、K、Mg、Fe的浓度。
测定离心管中的Cd浓度。具体做法：称取0.100 g烘干的过100目筛的土样，加入到微波消解管中，加入8 mL王水（VHCl : VHNO3 = 3:1）和1 mL 氢氟酸。消煮完全后加去离子水定容至10 mL, 使用ICP-OES测定样品中的Cd浓度。
1.6 数据处理
使用软件SPSS 21.0（SPSS Inc., Chicage, U.S.A）和Graphpad Prime 6.0进行数据处理和图形制作。