葡萄Rs基因的克隆序列分析及时空表达特征鉴定(5)
农杆菌转化：取200μl农杆菌EHA105感受态细胞，加入10 0ul质粒DNA，冰浴30min，之后于液氮中冻3-5min，37℃水浴融合5min，再加入1mlYEB（或LB）液体培养基，28℃，震荡4h，10000rpm/min离心30秒，去上清，加入200μl YEB液体培养基悬浮细胞，涂布含有相应抗生素的YEB（或者LB）固体平板上，28℃培养2d观察菌落生长情况。
农杆菌对葡萄愈伤组织的遗传转化参考郭斌[11]的方法。
2 结果与分析
2．1 葡萄基因组总RNA的提取及cDNA合成
从巨峰葡萄总RNA的电泳检测结果（图2）能够看出，提取的总RNA电泳条带完整清晰，虽有微量降解，但不影响后续实验的进行。