麦秸还田及水分管理对稻田土壤微生物特征的影响(2)
1 材料与方法
1.1试验地点
试验在南京农业大学试验农场进行，前茬为小麦，土壤质为粘土，耕作层有机质质量分数18.36g/kg、全氮1.02g/kg、速效氮94.8 mg/kg、速效磷22.5mg/kg、速效钾91.7 mg/kg。
1.2 试验设计与田间管理
试验采用三因素裂区试验设置，三次重复，主区为水稻品种，副区为水分管理模式，再副区为麦秸还田量。设置两个麦秸还田水平：无麦秸还田（S0）和麦秸还田量为6000kg/hm2（S6000），秸秆还田方式为经联合收割机粉碎后机械化旋耕还田。设置两个麦秸还田水平：无麦秸还田（S0）和麦秸还田量为6000kg/hm2（S6000），秸秆还田方式为经联合收割机粉碎后机械化旋耕还田。设置两个水分管理模式：（1）常规淹水灌溉(CI)，3-4cm左右水层插秧，水稻移栽后至无效分蘖期田面一直保持1-3 cm 的浅水层，根据降雨量大小进行适量灌排，无效分蘖期实行搁田。自孕穗开始到成熟期之前一周保持浅水层。（2）干湿交替灌溉(DWA)，1-2cm浅水插秧，移栽后 7 d 田间保持 1-3cm水层确保秧苗返青活棵，7d后进行干湿交替灌溉，用土壤水势仪监测土壤水势，根据降雨量大小进行适量灌排，当田间由浅水层自然落干至水势为-15KPa时，灌水至田面有1-3cm浅水层，再自然落干到土壤水势为-15KPa，再上浅层水。无效分蘖期实行搁田，孕穗期保持浅水层，抽穗期之后继续干湿交替，收获前1周断水，自然落干。
水稻季试验品种为淮稻5号，6月15日机插秧栽种，秧龄20d，叶龄3.3-3.5叶，株行距为13.3cm×30cm，采用30cm插秧机移栽，调节取秧量，并在机插移栽后进行人工定苗。水稻施肥为基肥氮素45kg/hm2，分蘖肥氮素135kg/hm2，穗肥氮素120kg/hm2，分蘖肥于移栽后7天和14天等量施入。磷肥P205用量10kg，全做基肥；钾肥K2O用量10kg，做基肥和促花肥等量施入。小区间薄膜包埂，单独排灌。
1.3土壤微生物有机质含量的测定
参照姚槐应的方法测定水稻成熟期土壤的微生物（包括细菌、真菌、放线菌）的数量和生物量态氮，取土样时将水稻植株连根一起挖出，收集土样。微生物采用稀释平板法计数，细菌采用牛肉蛋白胨培养基；放线菌采用高氏1号培养基；真菌采用马丁氏培养基。土壤中的生物量态氮采用改进的氯仿熏蒸法测定。
1.3.1牛肉蛋白胨培养基
牛肉膏 3g、蛋白胨 10g、NaCl 5g、琼脂 15—20g、水 1000ml、pH 7.4—7.6（7.0—8.0）按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、NaCl放入烧杯中。牛肉膏常用玻棒挑取，放在面皿中称量，用热水溶化后倒入烧杯。先加入少于所需要的水量，用玻棒搅匀，然后，在石棉网上加热使其溶解。用精密pH试纸测量培养基的原始pH值，如果pH偏酸，用滴管向培养基中逐滴加入1mol/L NaOH，边加边搅拌，并随时用pH试纸测其pH值，直至pH达7.6。反之，则用1mol/L HCl进行调节。使最后PH为7.4-7.6。