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湿害胁迫下不同耕作方式对甜高粱产量性状及抗氧化酶系统的影响(3)
试验所用材料为甜高粱(大力士),由百绿(北京)国际草业有限公司提供。
1.2 方法
1.2.1 试验区概况
试验于2016年在江苏省兴化市(北纬32°40′至33°13′,东经119°43′至120°16′)的华夏畜牧有限公司进行。该地位于长江中下游地区,属于北亚热带湿润性季风气候,年平均气温15.0℃,年平均降水量1032.3mm,年平均降雨日(日雨量≥0.1mm)109天。兴化市每年于6月20日左右入梅,7月10日左右出梅,梅雨量平均为240mm;土质疏松,耕作层深厚,肥力中等,适合甜高粱的生长;前茬作物为小黑麦(Triticum)。试验地块土壤有机质20.63g•kg-1,碱解氮含量131mg•kg-1,有效磷55.47mg•kg-1,有效钾78.31mg•kg-1。
1.2.2 试验设计
试验采用单因素随机区组设计,小区面积为9m2(3m×3m),设置了垄作和平作2个处理,3个重复,实验小区之间大沟30cm,小沟20cm。垄作每小区起3垄,相邻垄之间间距为30cm,垄高15cm,垄面宽50cm,垄上种2行,行距是30cm。平作设计为宽窄行,宽行为80cm,窄行为30cm。单株株距为10cm,则估算播量大概为13340株/亩。播种前施入基肥(复合肥15kg/亩,N:P:K=20:8:18)。
2016年6月15日进行播种,苗期施入苗肥(尿素5kg/亩)。在三叶期进行间苗、定苗,并对小区进行渍水处理,水量保持在排水沟的3/4处,保证田间持水量为100%。并在渍水处理后的0、3、6、9d取样测定叶片超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)的活性。测定甜高粱的农艺性状时共进行4次取样(每隔20d左右),时间分别为7月11日、8月3日、8月24日、9月14日,取样后测定两种不同耕作方式下甜高粱的干鲜重、株高、茎粗、单株叶面积、叶数等指标。
1.2.3 试验测定项目和方法
株高:每个小区选取3株长势均匀的植株,测量拉伸株高。
茎粗:每个小区选3株长势均匀的植株,用游标卡尺测定根部向上第二节中间茎的直径,求其平均值。
单株叶面积:每个小区选3株长势均匀的植株,茎叶分离,用叶面积仪测得单株叶面积,通过相关换算得到甜高粱的叶面积指数。
单株鲜重和干物质重量:每个小区选取3株长势均匀的植株,留茬5cm刈割,茎叶分离后分别测量茎鲜重、叶鲜重。然后放入105℃烘箱中杀青15min,在65℃下烘干至恒重,称重后得到茎干重和叶干重,通过计算可得到茎叶比和干鲜比。
抗氧化酶系统的活性测定:在两次刈割时取样,每个小区取样3份。选取甜高粱最上部两片完全展开叶,经蒸馏水冲洗吸干,约称取0.3g鲜样加8ml0.05mol•L-1PH7.8PBS于冰浴中碾磨,4°C下10000×g离心20min,取上清液用于CAT活性、SOD活性、POD活性的测定,重复测定3次[7]。抗氧化酶系统的活性测定参照张宪政[8]介绍的方法,并略加改动,超氧化物歧化酶(SOD)活性测定采用氯化硝基四氮唑蓝(NBT)光化还原法;过氧化物酶(POD)活性测定采用愈创木酚氧化法;过氧化氢酶(CAT)活性测定采用紫外线吸收法。用SHIMADZU UA-2410PC分光光度计酶动力学
软件
测定吸光度的变化[7]。
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