盐碱地在世界范围分布较广,全世界的盐碱地约有9.6×105 hm2,其中我国盐碱地的面积就达到2.7×104 hm2[3],并随着生态环境的恶化和人类不合理地开发利用土地,世界盐碱地的面积仍在进一步增加,我国盐碱地的面积同样在进一步扩大[4]。盐碱地中Na+ 和Cl- 对植物的危害较重,严重时可影响植物生存、生长和繁殖[5]。植物耐盐性的研究主要包括盐离子的原初作用、次生作用和盐离子的渗透胁迫三种[6.7]。土壤盐碱化对于国内外农业栽培的发展十分不利,土壤盐分中Na+ 和Cl- 对植物的危害较重,不仅容易造成特殊离子效应的单盐毒害,同时还会影响其他离子(如Ca2+、K+)的吸收,使得植株吸收其他离子(如Ca2+、K+)的困难,使得植株营养缺乏,由于植株体内离子缺乏,使得植株渗透调节遭到破坏,严重影响了栽培作物的质量和产量[8]。本实验研究盐胁迫对紫苏幼苗生长的影响,可呼吁人们保护环境,保护土壤,防止土壤盐碱化。
盐胁迫对植株的危害主要包括:1.植株体内活性氧(ROS)大量积累,膜系统氧化损伤,可能引起植物体内激素的含量出现紊乱,从而造成植株的干物质积累量降低[9];2.膜系统氧化损伤,使得细胞内叶绿体和线粒体电子传递泄漏的电子增加[10],从而引起细胞内光合电子传递系统出现问题,引起光抑制[11];3.膜系统氧化损伤,可能引起植株体内的蛋白质和核酸变性,严重时甚至导致细胞死亡[12]。植物具有自我调节的能力减轻或抵御盐胁迫对细胞的伤害,自我调节的方式主要是通过限制盐分的过量吸收和调节抗氧化系统清除ROS积累[13],但是植物的这一调节能力具有一定的限度。
1  材料与方法
1.1  实验材料
供试材料为紫苏,经南京农业大学王康才教授鉴定为唇形科紫苏的种子。实验中使用的为紫苏幼苗。
1.2  实验设计
    试验在南京农业大学进行,2017年3月在室外采用土培,将紫苏种子播种于含基质的土壤中,自来水浇灌。由于紫苏种子萌发需要大量的水,所以播种后一次性浇灌大量的水,隔1d浇一次水,等到紫苏种子萌发出苗后,2-3d浇一次水。当高度到达15cm左右,将紫苏幼苗移栽,进行水培,水培在大型号的中转箱内,营养液为1/2Hoagland营养液,每个大型号的中转箱内的营养液为10L。在紫苏幼苗移栽时,尽量保护紫苏幼苗的根,增加紫苏幼苗的成活率。移栽后先使紫苏幼苗恢复生长,如若直接进行盐胁迫会降低紫苏幼苗的成活率,大约紫苏幼苗恢复七天后用1/2Hoagland营养液加不同质量的NaCl处理,使其最终盐处理浓度分别为0,50,100,150,200 mmol•L-1。以后每3d换一次营养液和盐溶液,使得溶液中有足够的氧气,盐处理期间,进行正常的栽培管理,盐溶液处理之前,先取样1次,然后在对紫苏幼苗盐胁迫处理后的第7d再一次取样。
1.3  测定内容和试验方法
株高:在每组中随机取5株紫苏幼苗,用尺子测量其株高(含根)。
鲜干比:每组中随机取紫苏幼苗植株,先用自来水洗净植株上的沙土,然后去除植株上的枯叶,用纸吸干紫苏幼苗表面水分,采取部分叶片称鲜重,然后置于干燥箱中,先用105℃对叶片进行杀青,然后再于80℃对叶片进行烘干至恒重后分别称干重,计算鲜干比。
SOD(superoxide dismutase,超氧化物歧化酶)的活性测定采用的是NBT(nitrotetrazolium blue chloride,氯化硝基四氮唑蓝法)法。POD(peroxidase,过氧化物酶)的活性测定采用的是愈创木酚法。CAT(catalase,过氧化氢酶)活性测定采用高锰酸钾滴定法。MDA含量测定采用TBA法。
1.4  数据统计
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