1.2.6 各种生理指标的测定

(1)叶绿素含量的测定
采取丙酮无水乙醇混合液提取法,即分光光度法[14]测定叶绿素的含量,测定时设置3个重复,最终含量用平均值表示。
(2)游离脯氨酸含量的测定
采取酸性茚三酮显色法[15]测定游离脯氨酸含量,测定时设置3个重复,最终含量用平均值表示。
(3)丙二醛(MDA)含量的测定
采取Sun等[16]的方法测定丙二醛(MDA)含量,测定时设置3个重复,最终含量用平均值表示。
(4)可溶性糖含量的测定
采用蒽酮法[17-18]测定可溶性糖含量,测定时设置3个重复,最终含量用平均值表示。
(5)可溶性蛋白含量的测定
采取考马斯亮蓝法[18]测定可溶性蛋白含量,测定时设置3个重复,最终含量用平均值表示。
(6)过氧化物酶活性的测定
采用愈创木酚比色法[18]测定过氧化物酶活性,以470 nm波长下每分钟每克料的光密度变化表示酶活性的大小,测定时设置3个重复,最终含量用平均值表示。

2 结果与分析

2.1 各种处理下小麦幼苗叶片中叶绿素含量的变化

各种处理下小麦幼苗叶片中叶绿素含量的变化见表1、图1。由表1、图1可知,对照组小麦幼苗叶片中叶绿素含量处于相对稳定水平。与对照相比,小麦幼苗在Pb、Cd胁迫、增强UV-B辐射胁迫以及Pb、Cd和增强UV-B辐射复合胁迫下,叶片中叶绿素含量发生了明显的变化。叶绿素含量整体呈下降趋势,胁迫时间越长,叶绿素含量越低。在增强UV-B辐射和Pb、Cd单独胁迫下第1 d和第3 d叶绿素含量变化较小,第5 d叶绿素含量迅速降低,分别下降了31.2%和26%。;在复合胁迫下小麦幼苗叶片中叶绿素含量呈明显下降趋势,处理5 d后,叶绿素含量下降了54.9%;这与刘兵[3]等报道的UV-B辐射使植物叶绿素含量降低以及张利红[19]等报道的高浓度重金属镉抑制叶绿素的合成等研究结果相似,本研究结果还表明重金属和增强UV-B辐射对小麦叶绿素含量的影响有叠加效应。
表1  Pb、Cd胁迫和增强UV-B辐射胁迫对小麦叶片中叶绿素含量的影响
处理 1 d 3 d 5 d
对照组 0.175 0.174 0.173
增强UV-B胁迫 0.151 0.141 0.119
Pb、Cd胁迫 0.159 0.149 0.128
复合胁迫 0.148 0.135 0.078

图1  Pb、Cd胁迫和增强UV-B辐射胁迫对小麦叶片中叶绿素含量的影响

2.2 各种处理下小麦幼苗叶片中丙二醛(MDA)含量的变化

各种处理下小麦幼苗叶片中MDA含量的变化见表2、图2。由表2、图2可知,与对照相比,随着Pb、Cd胁迫和增强UV-B辐射胁迫时间的延长,小麦叶片中MDA的含量均呈上升趋势。但是值得注意的是,胁迫处理3 d时,3种胁迫方式下的MDA含量差别不明显;胁迫处理5 d时,小麦叶片中MDA含量发生明显变化,复合胁迫下MDA含量最高,增强UV-B辐射胁迫下MDA含量变化最小,这说明Pb、Cd和增强UV-B辐射对小麦MDA含量的影响有叠加效应。这与段永平等
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