增强UV-B辐射和Pb、Cd胁迫对小麦生理生化特性的影(3)
1.2.6 各种生理指标的测定
(1)叶绿素含量的测定采取丙酮无水乙醇混合液提取法，即分光光度法[14]测定叶绿素的含量，测定时设置3个重复，最终含量用平均值表示。
(2)游离脯氨酸含量的测定
采取酸性茚三酮显色法[15]测定游离脯氨酸含量，测定时设置3个重复，最终含量用平均值表示。
(3)丙二醛（MDA）含量的测定
采取Sun等[16]的方法测定丙二醛（MDA）含量，测定时设置3个重复，最终含量用平均值表示。
(4)可溶性糖含量的测定
采用蒽酮法[17-18]测定可溶性糖含量，测定时设置3个重复，最终含量用平均值表示。
(5)可溶性蛋白含量的测定
采取考马斯亮蓝法[18]测定可溶性蛋白含量，测定时设置3个重复，最终含量用平均值表示。
(6)过氧化物酶活性的测定
采用愈创木酚比色法[18]测定过氧化物酶活性，以470 nm波长下每分钟每克料的光密度变化表示酶活性的大小，测定时设置3个重复，最终含量用平均值表示。
2 结果与分析
2.1 各种处理下小麦幼苗叶片中叶绿素含量的变化
各种处理下小麦幼苗叶片中叶绿素含量的变化见表1、图1。由表1、图1可知，对照组小麦幼苗叶片中叶绿素含量处于相对稳定水平。与对照相比，小麦幼苗在Pb、Cd胁迫、增强UV-B辐射胁迫以及Pb、Cd和增强UV-B辐射复合胁迫下，叶片中叶绿素含量发生了明显的变化。叶绿素含量整体呈下降趋势，胁迫时间越长，叶绿素含量越低。在增强UV-B辐射和Pb、Cd单独胁迫下第1 d和第3 d叶绿素含量变化较小，第5 d叶绿素含量迅速降低，分别下降了31.2%和26%。；在复合胁迫下小麦幼苗叶片中叶绿素含量呈明显下降趋势，处理5 d后，叶绿素含量下降了54.9%；这与刘兵[3]等报道的UV-B辐射使植物叶绿素含量降低以及张利红[19]等报道的高浓度重金属镉抑制叶绿素的合成等研究结果相似，本研究结果还表明重金属和增强UV-B辐射对小麦叶绿素含量的影响有叠加效应。表1 Pb、Cd胁迫和增强UV-B辐射胁迫对小麦叶片中叶绿素含量的影响
| 处理 | 1 d | 3 d | 5 d |
| 对照组 | 0.175 | 0.174 | 0.173 |
| 增强UV-B胁迫 | 0.151 | 0.141 | 0.119 |
| Pb、Cd胁迫 | 0.159 | 0.149 | 0.128 |
| 复合胁迫 | 0.148 | 0.135 | 0.078 |
图1 Pb、Cd胁迫和增强UV-B辐射胁迫对小麦叶片中叶绿素含量的影响