共生菌沃尔巴克氏体对杂拟谷盗交配选择和交配力的影响(2)
交配前选择生理上可以相互兼容的择偶倾向的机制是一种为了克服Wolbachia的感染引起的有害影响的潜在策略[11-13]。Kawanishi 和Watanabe[14]认为遗传上的差异引起的择偶偏好从根本上影响着雄性和雌性之间特定识别的行为。Markov 等[15]提出选择性交配取决于双方的基因型、感染情况以及交配对象间的组合，可能涉及到检测对方的基因情况，或者基于可能参与免疫系统组成的化学感应来检测对方与自身的生化相似性。已经有研究表明一些寄主个体趋向于选择能和自己相容的配偶是与Wolbachia的感染情况有关系[12,16]。配偶选择行为可以引起性隔离现象，它是一种个体间相遇但不发生交配行为的交配前隔离机制，性隔离有助于物种的形成。一般来说，性隔离发生在亲缘关系远的物种之间，但在实验室条件下，也会发生在部分相近的物种之间；性隔离可以看作两个种群或物种之间性行为的不一致或不协调[17]。
已知杂拟谷盗种群体内含有内共生菌沃尔巴克氏体，本研究预使用饲喂四环素面粉杀菌消除杂拟谷盗体内的共生菌沃尔巴克氏体，并搞清沃尔巴克氏体对杂拟谷盗的交配选择和交配能力是否有影响、共生菌与寄主杂拟谷盗之间是否存在互利共生关系，以期为今后可能在生产实践利用内共生菌沃尔巴克氏体对拟谷盗进行预防和控制提供参考。
1 材料与方法
1. 1供试昆虫
试验用杂拟谷盗置于相对湿度70%和29℃的恒温恒湿黑暗培养箱中，放在盛有小麦全麦面粉中玻璃瓶（带有透气小孔的盖）中进行饲养和繁殖。所用试虫在蛹期根据其生殖叶的形态鉴别雌雄并分开饲养在盛有面粉的塑料杯（带有透气小孔的盖）中，待其羽化后使用。
1.2 杂拟谷盗体内沃尔巴克氏体的抑制及消除
配制一定比例的四环素面粉，其中四环素粉末与面粉的比例为3:1000。准备四个培养瓶，其中两个各装入15克四环素面粉，另外两个各装入普通面粉15克。在四环素面粉的培养瓶中分别放入羽化2周的雌性和雄性杂拟谷盗各40只，同样，在普通面粉的培养瓶中放入羽化2周的雌性和雄性杂拟谷盗各40只。均饲养一个月后，四环素面粉喂养所获得的是去除了沃尔巴克氏体的杂拟谷盗（W-),而普通面粉喂养的杂拟谷盗（W+)则作为对照组。分别随机选取在四环素面粉中饲养的雌性和雄性杂拟谷盗，提取其DNA，通过对沃尔巴克氏体wsp基因进行PCR扩增的方法检测杂拟谷盗体内的沃尔巴克氏体是否已经被抑制生长并消除。
1.3 沃尔巴克氏体对雄性杂拟谷盗无选择和有选择交配选择的影响
此实验分成了雄性杂拟谷盗无选择交配实验组(1个雄Wolbachia阳性杂拟谷盗对1个 雌Wolbachia阳性杂拟谷盗、1个 雄Wolbachia阳性杂拟谷盗对1 个雌Wolbachia阴性杂拟谷盗、1 个雄Wolbachia阴性杂拟谷盗对1 个雌Wolbachia阳性杂拟谷盗、1 个雄Wolbachia阴性杂拟谷盗对1 个雌Wolbachia阴性杂拟谷盗共4个组合)和雄性杂拟谷盗有选择交配实验组(1 个雄Wolbachia阳性杂拟谷盗对1个雌Wolbachia阳性杂拟谷盗和1个雌Wolbachia阴性杂拟谷盗、1个雄Wolbachia阴性杂拟谷盗对1个雌Wolbachia阳性杂拟谷盗和1个雌Wolbachia阴性杂拟谷盗共2个组合)，每个交配组合均分别设置重复45个。具体交配观察的详细方法参考王阿旻等[18]。
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