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氰戊菊酯降解菌的选育及鉴定(3)
1.3菌株降解率的测定
分离纯化后的菌株能够在以氰戊菊酯为唯一碳源的无机盐培养基中存活、繁殖,可以初步判断这3份菌株(QBY01、QBY03、QBY04)有能力降解氰戊菊酯。
把纯化后的3份菌株按5%的接种量接种到以氰戊菊酯为唯一碳源的100 mL无机盐培养基中,每份培养基的氰戊菊酯含量为300 mg/L,同时各设置一份不接种菌株的无机盐培养基为空白对照,同时放入30℃、120 r/min的恒温摇床培养,绘制标准曲线,分别取3 d,5 d的培养液分别测定降解样品液的吸光度值,计算出降解率并作对比。
1.3.1绘制标准曲线
在100 mL的无机盐培养基中添加0.75 g 20%氰戊菊酯乳油,使氰戊菊酯终浓度约为300 mg/L,接种一环降解菌株,设不接菌为对照,每处理重复三次,30 ℃下在120 r/min摇床上培养3d。取对照样品充分摇匀后稀释成不同浓度取0 mg/L、50 mg/L、100 mg/L、150 mg/L、200 mg/L、250 mg/L和300 mg/L,用紫外分光光度计测定其吸光度,每个处理重复3次,以吸光度OD值为纵坐标,农药浓度为横坐标作标准曲线。
1.3.2测定降解率
每份接菌培养液取2mL,加入到8mL的氯仿溶剂中,充分震荡萃取后,放入4000 r/min的低温低速离心机中离心10 min,取下层有机相用紫外可见分光光度计,在波长为360 nm下测定每组中降解液的吸光度值并计算其质量浓度和降解率,降解率计算公式如下:
降解率= ×100%
1.4菌株的鉴定
1.4.1形态学鉴定
(1)肉眼观察菌落的形态特征
(2)用革兰氏染色法在显微镜下观察菌株的形态
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