本文采用系统预试法对光慈姑化学成分进行初步研究,以期为光慈姑品质评价以及其化学成分系统研究及活性成分的分析奠定基础。
1  材料与方法
1.1  材料与试剂
老鸦瓣鳞茎于2014年5月采自安徽省阜阳市阜南县老鸦瓣规范化栽培示范基地,经南京农业大学郭巧生教授鉴定为老鸦瓣Tulipa edulis (Miq.) Baker的鳞茎。并将老鸦瓣鳞茎于60℃条件下烘干后以粉碎机打粉,得光慈姑粉末。
95%乙醇、石油醚、三氯化铁、硅钨酸、α-萘酚、五水合硫酸铜、五水合酒石酸钾钠、三氯化铝、铁氰化钾、氯化钠、明胶、茚三酮、硫酸铵、氢氧化钾、氧化氢、盐酸、硼酸、浓硫酸、氯仿、3,5-二硝基苯甲酸、溴酚蓝、盐酸羟胺。所用试剂均为国产分析纯;实验用水为蒸馏水。  
1.2  仪器与设备
电子分析天平(BSM 220.4型,上海卓精电子科技有限公司)、电热恒温水浴锅(HH-S型,巩义市苏华仪器有限责任公司)、循环水式多用真空泵(SHZ-D型,巩义市予华仪器有限责任公司)、旋转蒸发仪(RE-2000 A型,上海亚荣生化仪器厂)、电热恒温鼓风干燥箱(XMTD-8222型,上海精宏实验设备有限公司)、台式高速冷冻离心机(5810 R型,eppendorf 中国有限公司)等。
1.3  方法
1.3.1  预试样液的制备
水提液:称取光慈姑粉末5 g,置150 mL圆底烧瓶中,加入50 mL蒸馏水,于50-60℃水浴加热约1 h后过滤,滤液冷却至室温,得水提取液。
乙醇提取液:称取光慈姑干粉5 g,置150 mL圆底烧瓶中,加95%乙醇50 mL,70℃水浴上回流1 h后过滤,滤液冷却至室温,得乙醇提取液。
酸性乙醇提取液:称取光慈姑干粉5 g,置150 mL圆底烧瓶中,加95%乙醇50 mL,70℃水浴回流1h后,过滤后减压浓缩至膏状,置于研钵中,用少量5%的盐酸捏溶,取盐酸水溶液,得酸性乙醇提取液。
石油醚提取液:称取光慈姑干粉1 g,置150 mL圆底烧瓶中,加石油醚(沸程:60-90℃)10 mL,水浴回流30 min,过滤,滤液减压浓缩至20 mL,得石油醚提取液。
1.3.2  试管预试法
因光慈姑化学成分研究较少,其所含化学成分类别未知,故对光慈姑水提液、乙醇提取液、酸性乙醇提取液、石油醚提取液等四个提取部位均进行系统预试验的检测,整体分析光慈姑所含化学成分类别。
按照文献[13]中所述的试管预试验方法,分别对上述光慈姑四个不同提取部位,进行糖类、生物碱、黄酮、酚类、鞣质、氨基酸、蛋白质、蒽醌及其苷类、甾体、三萜、香豆素、强心苷、皂苷、有机酸、挥发油等成分的检测。
2  结果与分析
2.1  水提取物成分
水提取物的化学成分分析结果见表1。从表1中可知,糖及其苷类检识,生物碱类检识,黄酮类检识,内酯香豆素类检识,有机酸检识,皂苷类检识均呈阳性,表明水提取液中肯定含有糖类、多糖或苷类、还原糖、生物碱、黄酮类、内酯香豆素类、有机酸、皂苷。FeCl3试验、氯化钠白明胶试验为阴性,三氯化铁-铁氰化钾试验为阳性,表明不存在鞣质可能含有酚类。其氯仿-浓硫酸反应为阳性,可初步确定含有甾体或三萜类,具体为哪一类化合物还需进一步确定。其盐析反应、双缩脲反应、茚三酮试验反应结果为两阴一阳,且水提液放置后出现沉淀,可能是由于蛋白质、多肽含量较低或存在于沉淀中。
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