山楂黄酮的提取研究(3)
山楂保护内皮细胞作用的机制与其所含的天然活性成分有关，一方面通过其抗氧化作用，抑制LDL的氧化修饰，减少脂质过氧化物的形成，阻断有害物质的产生;另一方面，通过直接作用于内皮细胞，调节内皮细胞功能，增强内皮细胞对有害因子的抵抗力和耐受性，从而保护内皮细胞免受损害[27]。常翠青[28]等通过探讨山植对人血管内皮细胞的保护作用及其机制发现山植可以有效地保护人内皮细胞免受LDL的损伤，其机制与山植的抗氧化作用和对EC的直接作用有关。本实验主要对两种不同的提取方法对山楂黄酮进行提取，分别是乙醇回流法和超声波提取法，并分别做四个影响因素的分析，分别是乙醇浓度，提取时间，提取温度，料液比，最后做正交实验的分析并选出最佳的提取条件并加以比较，最后对山楂不同部位的黄酮含量进行提取并比分析。
2 材料与方法
2.1实验材料
2.1.1 试剂溶液
试剂：芦丁标准品（净重20 mg，含量99 %+），无水乙醇（AR），亚硝酸钠（AR），硝酸铝（AR），氢氧化钠（AR），新鲜山楂干。
2.1.2 仪器与设备
表2.1 器材与设备一览表
仪器设备 生产地 编 号
电子分析天平
电热恒温鼓风干燥箱
中药粉碎机
分光光度计
数控超声波仪器
北京赛多利斯仪器系统有限公司
上海精宏实验设备有限公司
上海淀久中药机械制造有限公司
上海光谱仪器有限公司
昆山超声仪器有限公司 LA6200S
DHG-90764A
DJ-02
721E
KQ-600E
2.2 实验分析方法
2.2.1 芦丁标准曲线的绘制
精确芦丁标准溶液0、1.0、.2.0、.3.0、.4.0、5.OmL分别置于6只25mL比色管中，用50%乙醇补足至10mL。加5%亚硝酸钠1mL，摇匀，再加10%硝酸铝溶液1mL，摇匀，放置3min，加氢氧化钠溶液10mL，摇匀，放置10min，以50%乙醇水溶液为空白，于510nm处测定吸光值。得到回归线性方程。