然而干旱成为制约我国粮食生产的主要逆境因子之一,严重制约了农作物的高产和稳产。因此,对于怎样提高植物的抗旱性,增加农作物的产量一直是人们关注的焦点[2]。研究表明, 植物在不同的生育期所遭受到的不同程度的干旱, 均会导致农作物的产量下降。因此,合理进行土地的开发、有效的利用干旱土地的资源,合理进行土壤化学改良、水土管理、耐旱作物品种的培育和选种以及施加一些改良剂等措施以缓解土壤干旱程度,促进农业快速不断的发展,已经成为国内外生物科学领域迫切需要解决的热点问题。

硝普钠(SNP)为一氧化氮(NO)的释放剂。NO的作用非常广泛,是生物信号分子中十分关键的一种,如今不管是在国内,还是在海外,都强烈吸引着科学研究人员的眼球。前人研究表明,NO对植物的成长发育及代谢调控具备一定的影响,比方说,NO可对种子的萌生、幼苗嫩叶的伸长、影响黄花苗的脱黄化及体内的一些生化反应等具有重要的调节作用[3]。前人的研究表明,NO不仅能促进豌豆的生长和发育,比如一氧化氮能够提高植物幼苗的冠根比,促进豌豆幼苗的根系伸长和侧根的生长,而且它还能改变由于铁毒害以及缺铁所引起的豌豆幼苗抗氧化代谢系统的变化。随着种植作物的土壤缺铁程度的不断加剧,NO会使植物根部的过氧化氢酶、超氧化物歧化酶和抗坏血酸过氧化物酶的活性都有不同程度的增强,并使植物根系的丙二醛、氧离子以及过氧化氢的含量都有所下降。以上的实验结果可以表明,NO通过对植物体内Fe3+的动态平衡及铁营养状况的不断地改善,可以增强缺铁豌豆幼苗的抗氧化能力[4]。还有一些相关的研究表明,在涝害胁迫条件下,一定浓度的一氧化氮能够增强牛膝叶片中超氧化物歧化酶、丙二醛和过氧化氢酶的活力,但SNP超过1.0mmol/L时,其酶活性开始下降,而且在涝害胁迫的影响下,其叶片的光合速率都有一定程度的增强[5]。但硝普钠对渗透胁迫下豌豆种子在其发芽进程中的抗氧化代谢调控还了解的不是很多。

因此,本试验经过对豌豆种子进行SNP浸种处理,研究其对渗透胁迫下豌豆种子萌发的影响(萌发率,萌发势和α-淀粉酶活性等)及其抗氧化代谢酶活性(SOD、CAT、MDA等)的调控。进而探求 NO对渗透胁迫下豌豆种子发芽进程中抗氧化代谢的调控。以期明确外源硝普钠对渗透胁迫下对豌豆种子萌发的影响及调节作用,为豌豆干旱灾害缓解技术研发提供理论支持。

1. 材料与方法

1.1实验材料

豌豆种子(中豌2号,由周口市农科所提供)。

1.2试剂 

    外源NO供体硝普钠。

1.3材料培养与处理

 选取无病虫害优质的豌豆种子,经2.5% NaClO浸泡处理,时间为10分钟,用蒸馏水将种子分多次清洗,分别用0.1、0.3、0.5、0.7、1.0mmol/L的SNP溶液浸种24h,对照和单独胁迫处理用蒸馏水浸种。然后把经不同浓度SNP浸种的豌豆放入垫2层滤纸的培养皿内做萌发实验。用0.1、0.3、0.5、0.7、1.0mmol/L的SNP溶液浸种处理分别标记为T2、T3、T4、T5、T6,用15%(W/V)PEG-6000模拟渗透胁迫标记为T1,以未用SNP处理的种子加10ml蒸馏水为标记为对照(CK)。室温下培养。3d 统计发芽势,8d统计发芽率,于处理的第1、3、5、7天取样测定种子的α-淀粉酶活性及其抗氧化代谢酶活性(SOD,CAT和MDA)。

1.4测定内容与方法

1.4.1种子的发芽势及发芽率的测定

    发芽势=三天内萌发种子粒数/测试种子总数(50)×l00%。

    发芽率=全部萌发种子粒数/测试种子粒数(50)×100%。

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