生物法制备天然烟用香料+文献综述(4)
烟草中存在着大量的微生物群落，包括细菌、放线菌、真菌、酵母菌等，不同种类烟草所含的微生物种类也各有所异。正是烟草中的微生物 作用及产生的酶作用贯穿着烟叶发酵的始终，并且在烟叶陈化发酵过程、改善香气等方面起着重要作用。
烟叶发酵目前主要有自然发酵和人工发酵两种方式，人工发酵的烟叶质量不及自然发酵质量好，我国人工发酵在国内卷烟厂的烟叶陈化发酵中仍占相当大比重。Izquierdo等人[14]发现，用微生物接种的烟叶，香气和性状均得到改善，尤其是当采用微球菌属(Micrococcus)或杆菌属(Bacillus)或两者的混合物接种烟叶时，烟叶蛋白质含量降低，可溶性氮尤其是氨态氮和酰胺氮含量增加。
混菌发酵在烟草生产中占着很大比例，所谓混菌发酵是指依靠两种或多种微生物共同培养来完成，其相对于单一菌种发酵由于互利共栖协同作用的存在，能克服中间产物过大对发酵产物生成的不利影响，并且能促进酶活性提高产率[7]。
1.2 酶法处理烟草
烟叶内含物质的转化是一个物理和生理生化相结合的过程，其中生理生化反应显得尤为重要，无论是调制过程还是陈化发酵阶段，都是由相关微生物和酶作用完成的。烟叶是由多种有机物组成的，含量较多的主要有纤文素、淀粉、果胶、蛋白质等，其中淀粉和蛋白质在成品烟丝中含量较少，因为在烟叶陈化发酵的处理阶段，经过微生物和酶的作用，大量淀粉和蛋白质被降解，降低了烟草吸食的刺激性和杂气，从而提高了烟草的质量[18]。因此，处理成品烟丝让其适宜微生物发酵制备烟用香料，需要将成品烟丝中含量较多的纤文素和果胶降解为单糖和多糖，以便微生物利用和提高烟用香料的产量。
1.2.1. 纤文素酶、果胶酶酶解烟草的可行性
纤文素酶是一种重要的酶产品，是一种复合酶，主要由外切β-葡聚糖酶、内切β-葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶等组成。纤文素是由葡萄糖组成的大分子多糖，是植物细胞壁的主要成分。纤文素是烟草的主要结构成分，觉得这烟叶的完整性，但是烟叶配方中高纤文素含量一般对燃吸品质具有副作用[20]。
果胶酶是一种可以分解果胶的多酶复合物通常包括原果胶酶、果胶甲酯水解酶、果胶酸酶。通过它们的联合作用使果胶质得以完全分解。天然的果胶质在原果胶酶作用下，转化成水可溶性的果胶；果胶被果胶甲酯水解酶催化去掉甲酯基团，生成果胶酸；果胶酸经果胶酸水解酶类和果胶酸裂合酶类降解生成半乳糖醛酸。果胶质是亲水性胶体物质，通过渗透作用对烟叶的吸湿性和弹性起一定作用，但果胶质对烟叶品质不利，而且对于烟草吸质量来说，果胶质是一种不利的化学成分[19]。果胶的存在，会增加酶解液的黏度，降低酶解的效果；同时黏度的增加，会很大程度的影响微生物的生长，从而影响了发酵的效果，降低了香物质的产生。
所以，运用酶技术处理烟草，降解其中的纤文素和果胶是必要的，同时，运用酶技术降解纤文素和果胶等已被接受为完全降解破坏细胞壁的方法，这些酶法工艺有着高产率并且不需要推动力的优点[17]。
1.2.2. 影响酶解效果的因素
不同的酶根据其来源以及组成结构不同，都有着不同的性质和不同的最佳酶解条件。所以，在本课题中要将烟草运用纤文素酶和果胶酶酶解处理，所必要的就是找出它们的最适酶解条件。
(1)温度 酶对温度极为敏感,绝大多数酶在60℃以上即变性、失活。在低温时酶反应进行缓慢；当温度逐渐升高时，反应速率也逐渐升高；到最高峰时，温度如继续升高反应速率很快降低。
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