1.2.2 Sox2与早期胚胎发生

在胚胎发育的早期，由于sox2 与oct4 在桑椹胚、内细胞团、上胚层和生殖细胞中的表达广泛重叠，不仅提示两者在维持多潜能性方面的平行作用，而且可把sox2作为早期鼠胚多能性谱系细胞的一个标志物。同时，sox2 也是胚外外胚层具多种发育潜能的细胞的一个标志物。从此期胚外外胚层分离的滋养层干细胞也表达sox2，但当其分化为成熟的滋养层细胞时，sox2 的表达下调，因此，在发育潜能受限的细胞中sox2不表达。

1.2.3 Sox2与神经发育

在老鼠、爪蟾、鸡等中，sox2 在早期神经板和神经管中广泛表达，因此可作为一个最早的全神经标志基因[10]。有人认为sox2强化了此期神经细胞的命运并促使细胞进一步特化。稍后sox2在发育的中枢神经系统中的表达开始局限于室层的神经上皮细胞。就目前的研究来看，在小鼠中sox家族在神经系统中的功能尚不清晰，仍需要进一步的深入研究。

1.2.4 Sox2与晶状体发育

sox2在晶状体发育中表达的特点：sox1的表达紧接sox2，sox2表达快速转换为sox1表达，sox3不在小鼠晶状体中表达。在晶状体开始分化之初，即8.5~9.5dpc，sox2在腹方的头外胚层表达，并一直延伸到侧面，背方的表达只限于那些与将来产生晶状体的区域大致吻合的区域。在胚胎10.5dpc，晶状体基板内陷形成晶状体窝时，在与视杯接触并凹陷形成晶状体泡的外胚层区域sox2高度表达。这说明sox2的上调与晶状体基板的诱导是紧密相连的。到11.5dpc，晶状体由外部的上皮层和位于内部的延伸的纤维团组成，sox1在两层都有表达，sox2的表达下调仅存微弱表达，此种情况一直持续到13.5dpc。到了15.5dpc，在晶状体纤维细胞核中仍能检测到Sox1蛋白，而Sox2蛋白已检测不到。

2. 实验内容与设计

2.1 实验目的与意义

视觉功能是人体最重要的感觉功能之一，人从外界获取的信息有80%是通过眼睛来实现的。视力障碍从多方面影响人们的正常生活，随着环境、先进科技带来的生活习惯的变化，视力障碍人群逐年增多，其治疗也逐渐深入。视网膜病变是引起视力障碍重要原因。视网膜有许多遗传的或者后天获得的疾病，其中包括：青光眼、视网膜色素变性、黄斑病变、视网膜脱落、视网膜黄斑衰退症。因此了解视网膜、视神经的发育过程是治疗视网膜、视神经疾病的必要手段。

在研究视网膜发育和疾病中，Sox2在早期胚胎的神经管表达，随后在视网膜和神经中枢表达，对早期胚胎发生、神经发生等重要的发育事件中起重要作用运用。构建小鼠模型一般都采用Cre-LoxP重组酶系统的转基因小鼠作为模型。Cre-LoxP重组酶系统的转基因小鼠可以很好的避免传统转基因技术的一些缺点。针对全身转基因会出现的弊端，本实验采用Cre-LoxP系统构建Sox2-CreER小鼠，为视网膜和其他神经系统相关的研究提供特异性敲除loxP位点的工具鼠。

本课题将构建完成的Sox2-Cre小鼠做基因型鉴定，为之后详细的表达分析等实验做铺垫，对其他基因在视网膜中作用的研究提供非常有价值的工具，推动视网膜发育中的基本机理和疾病治疗的研究。

2.2 实验内容

⑴ 饲养Sox2CreER小鼠品系；

⑵ 取小鼠的尾巴，使用多对引物进行基因型鉴定；

⑶ 判断小鼠的是否转基因成功