翻译后修饰(Post-translational modification, PTM)，顾名思义发生在蛋白质翻译后的加工和成熟步骤，产生的修饰标记对绝大部分真、原核生物的蛋白质生理功能起重要的调节作用[12]。最早的蛋白质PTM文献主要集中于组蛋白相关功能的报道[13]。组蛋白是参与构成核小体的核心成分，它们一般为碱性蛋白小分子。组蛋白N-末端通常富含赖氨酸，易被修饰形成PTM，在核质内呈游离状态[14]。组蛋白PTM通常会引起DNA空间结构的变化，最终影响相邻基因的转录表达等[15]。这种调控机制在植物与环境的相互应答过程中扮演着非常重要的角色[16]，相关生理功能的研究已取得丰硕的成果。不过，涉及组蛋白PTM 代际传承的表观遗传机制尚无定论。通常而言，有关组蛋白修饰的表观遗传机制采用“电荷中和模型”、 “信号网络”和“组蛋白密码”等理论解释[17]。

提前终止密码子(Premature termination codon, PTC)是指真核生物mRNA编码非末端氨基酸的终止密码子(TAA, TGA, TAG)[18]。生物体内的PTC主要来自于基因无义突变(Nonsense mutation)或者RNA转录过程中的误差[19]。转录效果中三因RNA剪接噪音产生的PTC,平常可以被无义介导的mRNA降解机制降解[20]。 

最近几年，研究者发现有大量含有PTC的mRNA存在于动、源`自,优尔.文;论"文'网[www.youerw.com植物还有低等真核生物里[22]，还有PTC存在通读(Read-through)概率。主要的是，这些PTC通读产生的变异蛋白和大豆光合作用效率[23, 24]等一些存在着密切关系。本研究将探索大豆组蛋白H3-PTC对植物耐逆境胁迫能力影响。

1.材料与方法

1.1. 材料

试验材料是 Union85140盐敏感大豆，由中国农科院作物科学研究所邱丽娟研究员惠赠。

1.2. 试验方法

1.2.1 大豆组蛋白H3基因的克隆

A. 植物总RNA的检测及提取 ：

（1）、放入1g的大豆，将把它用液氮研钵充分预冷，研成粉末。

（2）、趁粉末自然液化之前，迅速转入1.5mL 离心管(约至0.7~0.8mL高度)，加入600 

ulBuffe RL (使用前加入β-巯基乙醇)，混匀，并涡旋震荡，充分裂解。

（3）、将步骤（2）所得的干净裂解液转入 2 ml Shredder Spin 管(RNase-Free, CollectionTube)，12000 rpm(~13400g)离心2分钟。

（4）、将步骤（3）中的上清转移到新的1.5mL离心管中，加入0.5倍体积的无水乙醇，迅速混匀。

（5）、将步骤（4）中的溶液转移到吸附柱Spin Column RM中，10000rpm（~8000g）离心15秒，弃掉滤液，将吸附柱重新放回收集管中。

（6）、加入350ul Buffer RW1，10000 rpm离心1分钟，弃掉滤液。