1.2.1 抗氧化作用
傅茂润,王晓等采用亚油酸氧化抑制作用、超氧阴离子清除能力、还原能力和DPPH自由基清除能力这四个抗氧化评价体系,阐明了紫藤花中的酚类物质、黄酮类化合物具有抗氧化作用[8]。
1.2.2 凝集作用
紫藤中提取的凝集素类物质,不仅具有影响糖运输、储存物质的积累以及细胞分裂的调控等作用外,还可以凝集人的各种血型和树种动物血以及受抑制作用较小的特性[9,10]。
1.2.3 抑菌作用
藤叶片对香瓜枯萎病、白菜软腐病等细菌性病害的病菌具有显著地抑制作用[11]。
1.2.4 抗肿瘤作用
紫藤皂苷D、紫藤皂苷G和脱氢大豆皂苷能抑制由癌促进剂12-O-十四烷酰波醇-13-乙酸乙酯所诱发的Epstein-Barr病毒早期抗原的活花[12]。
2 材料与方法
2.1 材料、仪器与试剂
2.1.1 植物材料
实验材料为紫藤,2013年3月采集于淮阴师范学院生物科技园,经作者鉴定后再经指导老师赵利琴老师鉴定确认。
2.1.2 实验仪器
电热恒温鼓风干燥箱 上海精宏实验设备有限公司
数显恒温水浴锅 国华电器有限公司
循环水式真空泵 巩义市英峪予华仪器厂
旋转蒸发仪 上海亚荣生化仪器厂
WFH-203三用紫外分析仪 上海精科实业有限公司
分样筛 钱上明萌纱筛厂
TH-1型薄层加热器 上海科哲生化科技有限公司
2.1.3 试剂与药品
试剂:工业乙醇,石油醚,二氯甲烷,95%乙醇,甲醇(所有试剂都为分析纯),100-200目硅胶。
显色剂:硫酸香草醛
薄层层析硅胶HG/T2354-92。
2.2 实验方法
2.2.1 实验材料的处理
将采下来的紫藤花放入电热恒温鼓风干燥箱中,于75℃干燥,然后将烘好的紫藤花及时用绞肉机粉碎,过60目筛后的粉末放入冰箱中备用。
2.2.2 工业酒精的处理源'自:优尔:"论-文'网www.youerw.com
工业酒精用旋转蒸发器进行纯化,将纯化后的酒精集中放入酒精壶中备用。
2.2.3 植物成分提取
称取1kg干燥紫藤花粉末用纯化后的工业乙醇加热回流装置提取,回流提取三次,每次时间为2小时。料液比1:10,过滤去残渣,将所得提取液用旋转蒸发器回收溶剂,并合并浓缩液,倒入蒸发皿中,置于水浴锅上挥发干,得乙醇总浸膏150g,得率为15%。
2.2.4 石油醚萃取
将紫藤花乙醇浸膏加入适量的蒸馏水充分混匀,倒入的广口瓶中,然后加等体积的石油醚,静置24小时,可以看出清晰的分界,用分液漏斗分出石油醚相。萃取三次,合并石油醚萃取液,用恒温水浴锅冷凝管常压蒸馏回收石油醚,得到石油醚萃取液18g。
具体提取分离的流程见图1。
2.2.5 硅胶柱层析
2.2.5.1 预处理(样品溶解、拌样、装柱及上样)
2.2.5.1.1 样品溶解
将5g石油醚萃取物放入蒸发皿中,加入合适的溶剂,于水浴锅中加热溶解。等完全溶解后,放在一边待用。