3.3 不同浓度1,2,4,6-Tetragalloyl glucose对HT-29细胞活性的影响 10

3.4 用流式细胞仪检测细胞凋亡率 11

结  论 12

参考文献13

致  谢 15

1 前言  

1.1 泡核桃简介

泡核桃（J.sigillata Dode）起源于云南、四川、西藏等省（自治区），其中地处滇西的漾濞县占有重要位置。西藏农牧科学院以及中国农业科学院的学者于20世纪80年代通过对泡核桃分布地区考察以后发现，泡核桃属乔木，树皮灰色，浅纵裂；小枝青灰色，有白色皮孔，二年生枝色稍深。冬芽卵圆形，芽鳞有短柔毛。单数羽状复叶，稀顶生小叶退化，长15~50 cm，叶轴及叶柄有黄褐色短柔毛；小叶通常9-11(稀15)枚，卵状披针形或椭圆状披针形，长6~18 cm，宽3~7 cm，顶端渐尖，基部歪斜，侧脉17-23对，下面脉腋簇生柔毛。雄花序粗壮，长13.5~19 cm ，雌花序具1-3雌花，花序轴密生腺毛。果倒卵圆形或近球形，长3.4~6 cm，径 3~5 cm，幼时有黄褐色绒毛，成熟时变无毛；果核倒卵形，长2.5~5 cm，径2~3 cm，两侧稍扁，表面具皱曲。花期3~4月，果期9月。在西藏，不仅有核桃(J.regia L)和泡核桃(J.sigillata Dode)的原始群落，而且还有栽培类型。

1.1.1泡核桃功效

泡核桃仁营养丰富，含脂肪、蛋白质和多种无机盐，具有健胃、补血、润肺、益肾和补脑等多种功能，是一种很好的滋补品。据《本草纲目》记载，核桃仁能“补气养血，润燥化痰，温肺润肠，治虚寒喘咳”。传统中医常用核桃仁入药，主治肾虚耳鸣、腰膝酸软、虚寒咳喘、肠风血痢、痈疽肿毒、遗精阳痿、中耳发炎等。将核桃仁微炒，与黄酒服用，还可以治疗腰痛是我国西南适宜种植地区的重要经济树种。但是很多人会把泡核桃青皮作为废弃物处理掉，但其中含有丰富的药用价值。核桃具有抗肿瘤作用[1]。据资料记载，核桃叶、枝、青皮、树皮都有药用价值，具有消毒、杀菌、滋补、利尿、解毒等药效[2~4]。研究人员发现核桃青皮提取物对小鼠lewis肺癌细胞生长的具有抑制作用[5]，对于食管癌细胞增殖也具有抑制作用[6]，此外研究还发现青皮提取物对于免疫系统还具有一定的调节作用[7]。本文就探讨泡核桃是否对于结肠癌细胞也具有抑制作用，为结肠癌的治疗提供理论依据。

天然药材凭借其“副作用小，治病治本，经济实惠”的自身优点越来越受到人们的喜爱。但天然药材中化学成分十分复杂，一种单药本身就是复杂混合物，复方中的化学成分就更加复杂；天然药材中有效成分含量极低，加上提取过程中有些化学成分相互作用，含量发生很大变化，因此，天然药材检测手段的选择与质量标准的制定有很大困难。天然药材分析一般要通过样品制备（提取、纯化、浓缩）和分析检测（鉴别、检查、含量测定）等步骤完成[8]，采用分馏萃取的方法从泡核桃青皮中提取出粗提取物，并对其进行活性检测，从活性较高的粗提取物中再提取出抑制结肠癌细胞的物质。研究人员发现从核桃青皮粗提物和核桃青皮提取物没食子酸、乙酸乙酯均能抑制食管癌细胞的增殖[9]，且抑制作用随着浓度的增加而增强[10]，对泡核桃青皮醇提取物或提活性部位的研究发现，探讨其对结肠癌临床应用中同样具有医疗的作用。

1.2 关于结肠癌的认识

恶性肿瘤是一类危及全世界人民生命的严重疾病，目前针对恶性肿瘤的治疗方法主要包括外科手术、放疗和化疗等[11]。结肠癌在恶性肿瘤中的发病率呈逐年上升的趋势。在欧美经济发达国家，居内脏恶性肿瘤的第一、二位，年发病率高达（35~50）/ 10万人；在我国，其发病率与死亡率约占常见恶性肿瘤的第六位。本病的发病年龄以40~60 岁居多，但 21~40 岁的青年患者亦占相当比例，约 40%。