摘 要：对采自淮安农村麦田土壤进行微生物的分离纯化。通过梯度稀释、涂布培养、分离纯化从土壤样品中分离和纯化了多株细菌，麦田土壤主要以细菌为主，放线菌和真菌的数量相对较少。根据分离出来的菌株的个体特征，菌落形态特征和生理生化特性的不同，对菌株进行初步的鉴定。选取生长趋势优秀的一个菌株，在不同的温度，PH值和盐浓度的生长条件下进行培养对比。70572

毕业论文关键词：土壤菌株，分离纯化，鉴定

Abstract：A soil sample was taken from the wheat field in HuaiAn. Over ten bacteria strains were isolated from this soil sample by gradient dilution and incubate on LB agar plate under 30℃. One of these strains was selected for further study, which was identified as Bacillus thuringiensis by its16S rDNA sequence analysis. The strain cells were simple stained and taken a picture by microscope camera. Different salt concentrations, PH value, temperature, and liquid volume affected on strain growth were studied in this work.

Keywords: Soil strain, Separation and purification, Identification

目  录

1 引言： 5

2 实验材料与方法 5

2.1土壤样品采集 5

2.2 制备土壤稀释液 5

2.3 培养基与试剂 5

2.4 涂布培养 6

2.5 划线培养 6

2.6 菌株16S r-DNA的扩增与序列分析 6

2.6.1 PCR扩增原理 6

2.6.2 琼脂糖凝胶电泳 6

2.6.3 菌株16S r-DNA序列测定与分析 7

3  结果与分析 7

3.1 菌株分离与菌落形态观察 7

3.2 菌株简单染色与菌体形态观察 7

3.3 菌株的鉴定 8

4.菌株的微生物学特性研究 9

4.1温度对菌株生长的影响 9

4.2 培养基初始pH值对菌株生长的影响 9

4.3 通气量对菌株生长的影响 10

4.4 无机盐浓度对菌株生长的影响 10

5 调查与分析 11

5.1 病原形态特征 11

5.2生理生化特征 11

5.3苏云金杆菌的优点 12

结  论 13

参考文献 14

致 谢 15

附 录1 16

1 引言：

土壤微生物对土壤的生态环境有着巨大的影响，它们参与了土壤中一系列的生化反应，并且他们的代谢产物也产生着巨大的作用。自然界中凡是肉眼看不清楚或看不见的微小生物统称微生物，一般包括细菌、真菌、放线菌、古菌、原生动物、纤维藻类和病毒等。微生物在土壤营养元素循环过程中起着十分关键的作用，细菌通过其自身的生理特性可引起土壤成分变化，调节土壤酸碱性等，为农作物的生长提供营养。论文网

由于土壤环境的复杂性和培养条件的限制，土壤微生物中仅有0.2%左右的种类能够培养，若以培养技术为基础来研究土壤微生物生态就会丧失较多信息 。随着分子生物学的理论与技术在微生物生态学研究中的不断渗透，微生物多样性的研究有了新的突破。而以16S r-DNA序列分析作为微生物分类系统的主要依据也得到了广泛认同。