表1-2 调节pH法处理发酵液的结果 11

表1-3 无水乙醇直接沉淀法处理的结果 11

表1-4 (NH4)2SO4分级盐析法处理发酵液的结果 12

表1-5 溶媒萃取法处理发酵液的结果 12

表1-6 纸电泳试验结果 13

表1-7 纸层析试验结果（水饱和正丁醇） 13

表1-8 纸层析试验结果（丁醇：醋酸：水=2:1:1） 14

表1-9 纸层析试验结果（水饱和正丁醇含2%六氢吡啶） 14

表1-10 纸层析试验结果（75%甲醇25%水） 14

表1-11 纸层析试验结果（水饱和正丁醇含2%对甲基苯磺酸） 15

表1-12 纸层析试验结果（正丁醇饱和的水含2%对甲基苯磺酸） 15

表1-13 纸层析试验结果（正丁醇饱和的0.5mol/L pH7磷酸缓冲液） 15

表1-14 光稳定性结果 16

表1-15 热稳定结果 16

表1-16 酸碱稳定性结果 16

绪论

冬青适合生长在亚热带地区，一般在温暖湿润的气候下能够很好地生长，但不光如此，它还具有一定的御寒能力。我们可以从海拔五百到一千米的山坡杂树林里发现冬青。除此之外，冬青生命力强大，也可在我们的周边环境种植，如草坪、花园、墙角等。冬青的叶、根、种子及树皮都具有药用价值，从其种子和树皮内提取的成分能补充人体内缺乏的营养素，从而改善人的体质。不光如此，冬青叶性质偏寒、味微苦，可以清热消炎，对气管炎和烧烫伤具有很好地疗效。此外，冬青叶含有一种成分，名为原儿茶酸，能够抑制细菌和真菌的生长繁殖。因此，冬青具有很大的药用价值，我们可以对其作进一步的研究。论文网

植物内生菌是指存在于植物自身组织内, 不会对植物自身产生伤害的一类微生物。对植物进行严格消毒，并把植物的不同部位分解为几个大小相近的组织块，进行培养，可以初步分离得到我们所需要的具有抗肿瘤活性的一种内生真菌[1]。植物内生真菌的次级代谢产物种类丰富、结构特殊、有多重药理作用, 因此，从目前来看，对植物内生真菌的研究已成为发现新的生物活性物质的一条不可或缺的途径。最近几年，许多抗肿瘤活性物质被发现，其大多数都源自于植物的内生真菌。二十世纪70年代初，美国化学家从红豆杉内生真菌中提取出了紫杉醇，研究发现，紫杉醇具有特殊的抗癌作用，可以对抗多种癌症并且副作用小，从而研究药用植物内生菌成为一大热点。目前来看，我们发现的抗肿瘤活性物质主要有生物碱类、黄酮类、多糖、蛋白质、以及紫杉醇等，其中大部分都是从植物内生真菌中提取出来的。通过实验我们发现，一株冬青内生真菌的代谢产物也具有一定的抗肿瘤活性。本课题主要目的是把冬青发酵液中具有抗肿瘤活性的成分分离提取出来，通过MTT检测法[2], 选择分离效果最好的方法分离出其抗肿瘤活性成分，帮助解决抗肿瘤药物的药源危机。