摘要为了探索大豆品种耐盐性的抗性机理，应用蛋白质组学技术。对大豆盐敏感品种Union85140和耐盐品种Wenfeng07萌发期幼苗的蛋白质组学研究，应用两种蛋白质组学技术：双向电泳—质谱方法和高效液相色谱—质谱联用方法对幼苗叶片的蛋白质组成进行对比分析。通过双向电泳——质谱的方法，高效液相色谱-质谱联用方法发现，大豆查尔酮异构酶等蛋白在盐胁迫条件下显著上调。为快速验证基因功能，我们采用拟南芥基因缺失型突变体(chs, chs/cpm, chs/chi)进一步验证了类黄酮代谢关键酶在植物耐盐中扮演着至关重要的角色。我们的研究结果表明，正常的查尔酮代谢起着大豆调节盐胁迫植物反应的潜在作用，并提供新的见解有助于研究这两个大豆品种耐盐性的差异的机制。72139

毕业论文关键词： 大豆； 耐盐性； 蛋白质组学； 双向电泳-质谱方法； 高效液相色谱-质谱联用方法； 类黄酮代谢

Abstract: To investigate the resistance mechanism of different soybean cultivars to salt tolerance。 In the current study, we compared phosphoproteomic and proteomic changes in roots of different soybean seedlings of a salt-tolerant cultivar (Wenfeng07) and a salt-sensitive cultivar (Union85140) induced by salt stress。 The 2DE-MS/MS and LC-MS/MS based proteomic studies showed that several salt responsive proteins, such as chalcone isomerase (GmCHI), chalcone isomerase (GmCHI) and cytochrome P450 monooxygenase (CPM), were involved in chalcone metabolism。 Hence, the functions of cytochrome P450 monooxygenase, chalcone synthase and chalcone isomerase were rapidly verified in knock down (KD) Arabidopsis variants (chs, chs/cpm, chs/chi)。 Our results reveal that chalcone metabolism plays a potential role in regulating plant responses to salt stresses in soybean and provide new insights into the mechanism contributing to the difference in salt tolerance of these two soybean cultivars。

Key words: soybean; salt tolerance; phosphoproteomic; 2 DE-MS/MS; LC-MS/MS; flavonoids metabolism pathway

目   录

1  引言 4

1。1 中国大豆现状 4

1。2 研究盐胁迫常用技术手段 4

1。3蛋白组学基本研究方法 6

2  实验材料与方法 8

2。1 种子萌发 8

2。2 水培条件下对大豆进行盐胁迫处理 8

2。3 双向电泳与质谱联用 8

2。4 高效液相色谱--质谱联用方法 9

2。5 拟南芥突变体耐盐表型分析 9

3  结果与分析 10

4  结论 13

参考文献 14

致谢 15

1引言

1。1中国大豆现状 

作为油料作物和经济作物的大豆，它同时又在食品工业和农业生产中占有重要地位。中国的大豆生产量大，需求量也大。我国大豆的进口量达到了全球大豆总进口量的60%[1]。日常生活中，大豆常被利用作制作豆浆、豆腐、厨房用的大豆油、酱油等。很多常见的大豆制品在饮食上也是尤为重要的，大豆种子含有丰富的蛋白质。有关大豆的最早的文字记载是在本草纲目里，大豆还是最重要的豆科栽培作物，也属于五谷之一。所以大豆在市场上处在供不应求的状况，对于增产大豆量的行动迫在眉睫。增加大豆的产量就得先增加大豆种植土地面积。但由于很多土地都盐碱化，也使大豆种植存在了一定的困难，所以对于在逆境中改善不同品种大豆产量的研究也是无论对国家经济或粮食上都具有重要意义。论文网