腐胺对盐胁迫下大豆幼苗叶片渗调物质含量的影响(2)
但是现在人类面临的土壤盐渍化越来越严峻，土壤的盐碱化问题日益威胁着人类赖以生存的有限的土地资源。全国有各种盐渍土地1亿hm2，其中现代盐渍土约0．373亿hm2，残余盐渍土约0．446亿hm2，其它潜在盐渍土约0．173亿hm2。盐碱地2．7×107 hm2，其中7×107 hm2为农田。土壤次生盐渍化面积在逐年增加，盐胁迫己成为世界范围内影响农业生产最重要的环境胁迫因子[2]。如何提高大豆的耐盐性是未来农业研究的重大课题。
多胺(Polyamine：PA)[3]是生物体代谢过程中产生的一类次生代谢物质，在调节植物生长发育、控制形态建成、提高植物抗逆性、延缓衰老等方面具有重要作用[4-7]，常见的多胺主要包括腐胺(Putrescine：Put)、亚精胺(Spermidine：Spd)和精胺(Spermine：Spm)。多年来的研究表明[8-12]，多胺这种生长调节物质在作物的逆境胁迫中（干旱，盐渍等）发挥重要作用，但多胺在涝渍胁迫中的研究还比较少。因此研究大豆对盐胁迫的响应以及外源物质多胺对盐胁迫下大豆幼苗的生理调控效应具有重要意义。因此本试验以郑豆30为材料，通过根施和喷施不同浓度的腐胺（多胺的一种），研究了腐胺对盐胁迫下大豆幼苗叶片渗调物质含量的影响，探索了多胺调控盐胁迫下大豆幼苗生长发育的生理生化机制，以期为在盐胁迫下对作物采用合理的调控措施提供理论依据，同时丰富多胺的逆境生理生化研究。
1.材料与方法
1.1材料
大豆种子（郑豆30，由周口市农科所提供）。
1.2试剂
腐胺（Putrescine, Put）购自sigma公司。
1.3材料培养与处理
精选饱满、大小一致且无霉变、无病虫害的大豆种子600粒，准备大小一致的大塑料盆30个，将取出的饱满大豆种子均匀播在底部有孔、装有粗沙的大塑料盆中（每杯20粒）。粗沙培养，定期浇水，待大豆幼苗长到两叶一心时定苗（每杯12株）（注：去除弱势苗），此时用 Hogland营养液培养。培养5天后分 6组进行处理，每组4杯。
① 根部施加Hogland营养液，叶面喷施清水（CK）
② 根部施加含有100 mmol/L NaC1的Hogland营养液，叶面喷施清水（S)
③ 根部施加含有100 mmol/L NaC1和0.1 mmol/L Put的Hogland营养液， 同时叶面喷施0.1 mmol/L Put溶液（S+0.1)
④ 根部施加含有100 mmol/L NaC1和0.5 mmol/L Put的Hogland营养液，同时叶面喷施0.5 mmol/L Put溶液（S+0.5)
⑤ 根部施加含有100 mmol/L NaC1和1.0 mmol/L Put的Hogland营养液，同时叶面喷施1.0mmo]/L Put溶液（S+1.0)
⑥ 根部施加含有100 mmol/L NaC1和1.5 mmol/L Put的Hogland营养液，同时叶面喷施1.5mmol/L Put溶液（S+1.5)
置于30±2/25±2℃(白天/夜晚)培养，自然光照，每天浇一次营养液（每次30ml）。处理5天后取不同处理的大豆幼苗叶片测定各项生理指标。实验重复三次，取平均值。
1.4 测定内容与方法
1.4.1幼苗相对干物质增长速率
胁迫处理前取三盆长势相同大豆幼苗，把根部的粗砂清洗干净，整株放于烘箱108℃中杀青0.5h，在70℃烘干6小时，在电子天平称量其干重并记录。同样把处理5天后的6盆中各取一盆进行如上述的处理。
最后再按照下式计算大豆幼苗相对干物质的增长速率:
RDWIR=（处理5天后12株干重—处理5天前12株干重）/（处理5天前12株干重）[13]
1.4.2相对电解质渗透率测定
按李振国的电导率仪法方法测定相对电解质渗透率[14]。具体方法：
剪取每盆中相同叶位、长势一致的大豆幼苗叶片，用无离子水冲洗后用滤纸吸干多余的水分，接着将大豆幼苗叶片打成直径为1.0cm叶圆片，并用无离子水冲洗和吸干外附水分，称重备用。