摘    要Penicillium expansum是水果主要采后真菌，会对果蔬的贮藏造成极大的危害。因此，找寻有效地防治方法具有重大的意义。本文把腐烂苹果中主要的病原菌进行了分离并利用rDNA-ITS法鉴定，鉴定为P。 expansum；并通过统计青霉菌孢子萌发率测定了硼酸的最低抑菌浓度，通过RP-HPLC法测定硼酸对扩展青霉产生的patulin生成量的影响，通过qRT-PCR法分析了硼酸对4种patulin合成的相关基因相对表达量的影响。实验结果为探索新的果蔬贮藏方法提供了理论以及实验依据。89853

Abstract Penicillium expansum is a major fruit postharvest fungi which can cause great harm to the storage of fruits and vegetables。 So it has great significance to find an effective prevention method。 In this paper, the main pathogen was isolated of the rot apples and identified by rDNA-ITS and it is P。 expansum。 Besides, the minimum inhibitory concentration of boric acid was determined by the experiment of germination rate of spores in P。 expansum。Production of patulin after boric acid treatment was determined by RP-HPLC。 The relative expression levels of four kinds of patulin biosynthesis genes after boric acid treatment were determined by qRT-PCR analysis。 The result gives theoretical and experimental basis for the storage of fruits and vegetables。源Q于W优E尔A论S文R网wwW.yOueRw.com 原文+QQ75201,8766

毕业论文关键词：扩展青霉; 棒曲霉素; 硼酸; 最低抑菌浓度

Keyword：Penicillium expansum; patulin; boric acid; minimum inhibitory

concentration

目    录

摘要2

1  实验背景·4

2  材料与方法·5

  2。1病原菌的分离及rDNA-ITS法鉴定·5

  2。2硼酸最低抑菌浓度的测定·5

  2。3 RP-HPLC法测定P。 expansum侵染的苹果果实中patulin含量5

  2。4总RNA分离和定量RT-PCR6

  2。5数据统计与分析·6

3  结果·6

      3。1形态学观察结合遗传背景来自优Y尔L论W文Q网wWw.YouERw.com 加QQ7520~18766 分析确定分离的病原菌为P。 expansum6

      3。2硼酸最低抑菌浓度测定结果为0。3%7

      3。3硼酸抑制P。 expansum代谢毒素patulin的产生··8

      3。4硼酸影响patulin合成过程中相关基因的表达·9

   4  讨论10

   参考文献··10

   致谢··13

1 实验背景

展青霉素（patulin）又称棒曲霉素，它是一种由扩展青霉产生的致癌性毒素。展青霉素是一种世界范围内的水果污染物，多种水果及相关制品中均有发现。对人及动物具有广泛而强烈的毒性作用，可引起恶心、呕吐等症状及体征，具有广泛的生物学活性。青霉菌生长能力较强，在适宜的条件下生长会产生孢子，扩散到空气中，落到果实表面。近年来，展青霉素会存在于一些霉变水果及青贮饲料中，patulin易引发果实各种青霉病，一旦接触果实伤口会迅速发病，降低了果实的保存时间，对果实贮藏业造成了极大的危害，目前，市场上主要的果蔬贮藏防治方法为杀菌剂的使用，调节温湿度，以及气调等方法。杀菌剂的弊端为可能引起化学成分残留，而调节温湿度的成本较高，而气调的方法普遍适用性不高。并且当今社会以人为本保护环境的理念人人皆知，所以找寻一种更廉价也更有效的贮存方法是必须以及必要的。

硼酸是一种重要的物质被用于农业上应对真菌等的控制。用作pH值调节剂、消毒剂等。硼酸也是生产其他硼化物的基本原料之一，由它生产的硼化合物广泛应用于国防及其他工业部门和科研单位。用作pH调节剂、抑菌防腐剂。因为其低价易得以及低毒的属性成为了当今果蔬采后防治的热点。有报道称，硼酸在多种果蔬的贮藏防治中扮演了重要的角色，大多果蔬防治中遇到的疾病都能利用硼酸来防治，虽然硼酸单独作用没有防治patulin 的先例，但是我相信硼酸在其他疾病中的利用也一定能用来防治展青霉素的代谢产物。硼酸作为一种无毒的化学物质以及其廉价易得的属性。据悉，硼酸对哺乳动物半数致死量仅为 2。66-5。14g /kg，所以适当的运用一定不会对人体产生有害的影响。硼酸必将成为一种非常具有潜力的果蔬防腐剂。论文网