结果 6

3。1槲皮素对体外A549细胞生长的抑制作用 6

3。2在划痕实验观察细胞迁移情况 7

3。3 DPPH自由基清除活性试验测槲皮素Q清除率 7

3。4细胞周期分布的检测 7

讨论 7

致谢 9

参考文献 10

附录 11

1前言

1。1肿瘤细胞

肿瘤实质是肿瘤细胞，是肿瘤的主要成分，具有组织来源特异性。它是指细胞在致瘤因素作用下，基因发生了改变，失去对其生长的正常调控，导致异常增生。肿瘤细胞属于异常细胞，死亡速率快于正常细胞，但是死亡速度仍较细胞新生的速度慢，这种不平衡缘于肿瘤本身的基因异常及宿主无法检测和破坏肿瘤细胞。其具有克隆起源、永生性和端粒、基因不稳定性、接触性生长抑制及锚定依赖性生长缺失、不依赖于生长因子和营养物质的进行性增殖、转移等特性。论文网

1。2槲皮素

  槲皮素，槲皮素，又名栎精，槲皮黄素，化学名为 3，3’，4’，5，7- 五羟基黄酮。可以入药，来治疗咳嗽、祛痰。另外还具有降低血压、增强毛细血管抵抗力、减少毛细血管脆性、降血脂、扩张冠状动脉，增加冠脉血流量等作用。槲皮素对多种恶性肿瘤细胞具有抑制生长作用，本研究拟利用A549细胞为模型，研究槲皮素对肺癌增殖、迁移的影响，以及其分子机制。

1。3 PI单染法检测细胞周期

    在完整的细胞周期中，细胞中DNA的含量在不同的细胞周期中是不一样的，所以利用核酸染料来标记DNA，可以分析细胞周期、细胞增殖和分裂能力。PI是一种荧光染料，只能对坏死的细胞或是细胞膜破裂的细胞进行染色。我们利用PI单染法就可能测出细胞处于什么周期，由此也可用来鉴定实验中化合物Q对A549细胞是否有抑制作用。

1。4细胞增殖

    细胞增值的方式是细胞的分裂。单细胞生物通过分裂产生新的个体。多细胞生物，通过细胞分裂产生新的细胞。

1。5 A549细胞

    A549细胞：A549细胞系为人肺腺癌细胞系，起源于II型肺泡上皮细胞,自1972就开始在体外连续培养，[7]。它既具有II型肺泡上皮细胞形态及特性[8]，又表现出典型的肺腺癌细胞恶性特征[9]。为此，A549 细胞不但是体外研究II型肺泡上皮细胞生长、分化、凋亡的模式细胞[6]，而且也是体外研究肺腺癌治疗的常用良好模型[7, 8]。

2 材料与方法 

2。1材料

2。1．1器材

二氧化碳培养箱（日本三洋公司）

超低温冰箱（德国西门子公司）

医用超净台（苏净集团安泰公司）

自动高压灭菌器（zealway，美国）

易普易达超纯水机（南京易普易达有限公司）

FA1104 电子天平（上海天平仪器厂）

电子恒温水浴锅（黄骅市综合电器厂）

Primor冷冻离心机（北京医用离心机厂）

磁力搅拌器(绍兴市卫星医疗设备股份有限公司)

倒置显微镜（Leica，德国）

酶标仪（BioTek，美国）

流式细胞仪（BD Accuri C6，美国）

2。1。2材料

连续培养的A549细胞株（实验室提供）

槲皮素（实验室提供）

96 孔细胞培养板，24孔细胞培养板（Becton Dickinson, USA）