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    谭龙飞等(2004)测试了五香粉精油对苏云金芽孢杆菌、面包酵母、黄曲霉等几种常见细菌、霉菌、酵母菌的抑菌活性,表明精油对7种供试菌种有较强的抑菌能力,尤其是对霉菌具有很强的抑制能力[2]。关文强(2005)研究表明,丁香精油对葡萄、冬枣、桃、蒜薹等果蔬采后主要病原菌具有良好的抑制效果,600 mg/L时能够完全抑制葡萄灰霉菌、链格孢菌、冬枣青霉的生长[3]。刘朝霞等(2006)研究表明,神农香菊精油对常见混合菌及酵母菌均有一定程度的抑制或杀灭作用,能明显 延长玉米馒头、香蕉泥的保藏期,因此其在食品生产方面具有防腐保鲜的潜力[4]。王微等(2007)研究表明,薄荷精油对黑曲霉等8种病原菌有很好的抗菌活性。顾仁勇等研究表明,连翘精油对黑曲霉、酿酒酵母等6种菌均表现出一定的抑制效果,对霉菌的抑制最为强烈[5]。
    1.3 精油蒸汽体抑菌进展
    1.3.1 植物精油蒸气体外抑菌
    精油蒸气在离体条件下的抑菌活性的研究尚未系统化,目前的研究方法较为多样。Lopez等(2005)采用圆盘挥发法,将浸渍了精油的圆纸片放在培养皿盖中,然后将接种了试验菌的培养皿底板立刻倒扣在盖子上,并用保鲜膜密封[6]。该方法的缺点是精油或精油蒸气可能与培养皿材料相互反应,或者密封不足导致蒸气流失。Becerril 等(2007)对此法做了改进,在修改了的方法中,将5mL的琼脂培养基加入到培养皿盖中,对整个培养皿进行密封,从而防止精油蒸气吸附在塑料的培养皿盖上[7]。Tyagi 和Malik(2011b)使用 “致死时间实验(kill time assays)”,将细菌暴露于某浓度的精油蒸气中一段时间,随后移除浸渍过精油的纸片,继续培养并观察微生物的生长,从而确定精油蒸气的动态抑菌活性[8]。Caccioni等和Gardini等(1997)提出了一种不同的方法来研究活性分子在顶空、培养基表面和内部之间的分配。他们设计了一种特殊的瓶盖,瓶盖内部带有小钢钩,小钢钩末端固定一个直径6毫米的滤纸片,在容积为10mL的瓶子中装入5mL接种了微生物的固体培养基,然后将瓶盖盖在瓶子上并密封。随着时间的变化,通过顶空自动气相色谱仪,对挥发性物质(顶部空间和培养基之间)的分配动态和微生物代谢物的产生等进行分析[9,10]。
    研究者通过上述的离体方法,发现多种精油蒸气对多种细菌、霉菌和酵母具有抑菌活性。Nerin团队(2007a, 2005, 2009)发现丁香、肉桂、百里香、牛至精油蒸气对于细菌、真菌和酵母菌均有良好的抑制效果,而生姜,迷迭香等精油蒸气的抑菌性略差[11-13]。Lopez 等(2007b)采用单滴微萃取,气相色谱-质谱联用 (SDME, GC-MS)检测精油蒸气的成分随时间的变化,并通过主要成分分析法确定香荆芥酚、百里香酚、肉桂醛为最有效的成分[14]。此外,Nedorostova 等(2009)通过改进的圆盘挥发法研究了27种精油蒸气对5种食源性细菌的离体抑菌效果,发现含硫精油和百里香精油效果最好[15]。Goni 等(2009)研究了肉桂和丁香精油蒸气结合使用时对于4种革兰氏阴性菌和4种革兰氏阳性菌的抑制作用,并对两种成分之间的相加效应、协同效应和拮抗效应加以确定,结果发现在一定浓度范围内(肉桂18-136 mg/L,丁香9-90 mg/L),肉桂和丁香精油蒸气的组合没有协同效应[13]。刘晓丽等(2010)比较了丁香精油、肉桂精油及混合精油蒸气对供试细菌、霉菌和酵母菌的抑制作用,发现它们对霉菌的抑菌作用明显高于酵母菌和细菌,同时发现混合精油中的两种成分对细菌的抑制有拮抗作用,对酵母菌的抑制没有影响,对Aspergillus flavu和A. nier有相加作用,对Penicillium citrinu有协同作用[16]。
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