1。 实验材料与方法

1。1材料

1。1。1菌种：原始黑曲霉菌

1。1。2斜面种子培养基：PDA培养基:将马铃薯洗净去皮后称取200g，然后放入1000ml的水中蒸煮，当到用玻璃棒轻戳便裂开时为止。再将煮烂的马铃薯用八层纱布过滤，弃渣取滤液，加蒸馏水补足1000ml。称取20g葡萄糖边搅拌边加入滤液中。再称取20g左右的琼脂粉使滤液在沸水浴中边搅拌边加入，及时的分装入试管中加塞、包扎，在121℃下高温灭菌20min。[13]

1。1。3基本发酵培养基：葡萄糖10g/L,玉米秸秆粉20g/L，（NH4）2SO4 2。5g/L KH2PO4 3g/L，MgCl2 0。8g/L,自然ph[2]121℃高温下灭菌20min

1。1。4主要试剂：⑴。DNS试剂：量取 750 mL 去离子水，加热至微热后顺序加入10。00 g 3,5-二硝基水杨酸、16。00 g NaOH、5。00 g 苯酚、5。00 g 亚硫酸钠和 300。00 g 酒石酸钾钠，溶解后定容至 1000 mL，棕色瓶中室温下暗处放置一周后使用[5] 

(2)木糖标准溶液：称量1g木糖标准品，用蒸馏水溶解之后再定容至1000ml。可得1mg/ml的木糖标准溶液，备用。

(3)发酵培养基中的化学制品：玉米秸秆、尿素、淀粉、蔗糖、葡萄糖、蛋白胨、牛肉膏、（NH4）2SO4、（NH4）2NO3、MgCl2、Fe2SO4•7H2O。

（4）磷酸盐缓冲液：按照陈建华和孙栋林所提供的配比表[6]取不同量的0。2M的磷酸氢二钾和0。2M的磷酸二氢钾调配不同PH的缓冲液,当配制PH低于5。8时用0。2M的磷酸二氢钾和NaOH进行调配。 

1。1。5实验仪器：烧瓶，平板，雷磁PHS-3CPH计（上海仪电科学仪器股份有限公司），SHANGPING FA2004B电子天平，SHANGPING YP1201N电子天平，UV759分光光度计（上海精科），SW-CJ-2D型净化工作台，HYG-C型多功能摇床，LS-75HJ型高压灭菌锅，GNP-9080型隔水式恒温培养箱。

1。2实验方法

1。2。1木糖含量测定方法（DNS法）：

（1）绘制标准曲线：分别量取0。2ml、0。4ml、0。6ml、0。8ml、1ml的木糖标准溶液，用蒸馏水定容至1ml。往试管中加入2mlDNS试剂，沸水浴2—5min，冷却后用蒸馏水定容至15ml，在540nm处测量其OD值[7]。根据所得数据可求得木糖标准曲线（见图一），并求得回归方程为Y=1。172X-0。192(R2=0。9994)。

（2）发酵培养液木糖含量：稀释样品使得木糖含量位于0。1mg/ml—1mg/ml，取1ml稀释后样品，往试管中加入2mlDNS试剂，沸水浴2—5min，冷却后用蒸馏水定容至15ml，在540nm处测量其OD值[7] 由木糖标准得出木糖含量。

1。2。2单因素法:首先保持培养的外在条件和发酵培养基中其他成分不改变，单独改变某一特定的培养基成分，从而对碳源、氮源、无机盐（MgCl2、Fe2SO4•7H2O）进行研究，得到最优的碳源、氮源以及最适的MgCl2和Fe2SO4•7H2O的浓度。然后保持培养基的成分不变，单独改变某一特定的培养外在条件，从而对时间，初始PH，温度，摇床转速进行探究，探求得最适的培养外在条件[8]。

1。2。3正交实验法：根据单因素实验法所得的结果，从中选择了葡萄糖，大豆蛋白胨，时间，初始PH，温度五个因素，每个因素设置了四个水平，并根据L16（45）正交表进行正交实验（见表1），其中各个因素之间没有交互并且各个水平之间也无混合。每个摇瓶进行三次重复测量，取其平均值作为最终测量结果以期减少测量误差[9]。

      葡萄糖 大豆蛋白胨 初始PH 温度 时间

1

10g/L