（因为图像配准时，亚像素级的移动都会给最终获得的多色超分辨图像带来很大的误差）。 因此，缓冲液的更换问题极大地限制了dSTORM在生物学领域的广泛应用。

1。4  本文的主要内容

综上所述，dSTORM技术利用成像缓冲液将空间中高密度分布的荧光分子在时间上分离 开，进而通过单分子定位探测实现超分辨成像。但是应用dSTORM技术进行生物大组织长时 程成像以及多色成像时，需要解决在不影响成像的前提下缓冲液的更换问题。因此，本文自 主设计制作了适用于现有dSTORM成像系统的样品池，能够实现成像过程中缓冲液的及时更 换，并通过成像实验证实该样品池可以应用于dSTORM成像。

第二章介绍了样品池的设计制作。针对样品池进液、密封和装配的问题提出设计方案， 通过绘制三维模型图和加工实物的检测验证方案的可行性，并逐一解决存在的问题，对样品 池做了一定的改进，最后通过对样品池实物进行性能检测验证其进液和密封的效果，并确保 可以将其用于现有的dSTORM成像系统。

第三章通过样品池和培养皿的比较实验评估样品池的成像能力。首先描述了现有 dSTORM成像系统的原理，并简述了成像实验的实现过程。通过实验结果的直观比较和单分 子特征信息的定量分析证实了样品池具有足够的成像能力，完全可以用于dSTORM成像。来~自,优^尔-论;文*网www.youerw.com +QQ752018766-

2 样品池的设计制作

从绪论1。3节的内容可知，成像缓冲液中某些成分的自然分解导致缓冲液在常温下不能 长期使用，而且dSTORM技术较低的时间分辨率使得完成一次生物大组织的成像需要几个小 时的时间。除此之外，在dSTORM多色成像中，不同染料需要配合不同的缓冲液以保证最好 的成像效果。因此，成像过程中，需要解决在不影响成像的前提下及时更换缓冲液的问题。 于是，一些公司推出了用于成像实验的样品池以解决更换缓冲液的问题[24, 25]。但是他们设计 的样品池的结构较为复杂，不方便使用，而且不适用于现有的超分辨定位成像系统。因此本 文基于实际需求自主设计制作了经济实用的样品池。

2。1 样品池设计的初步探索

考虑到样品池的缓冲液更新和适用于现有dSTORM成像系统的要求，我们将样品池的设 计分为三个部分：密封、进液以及装配。我们分别考虑如何实现相应的功能，确定设计方案， 然后根据设计方案寻找选择相应的配件，然后结合现有的加工条件和配件来确定样品池机械 结构的尺寸。