现有的检测方法主要分为的三类：理化检测技术，微生物检测技术，免疫检测技术。1理化检测技术    理化检测技术包括高效液相色谱法，气相色谱法，质谱法以及联用波谱和色谱的联用技术等，其原理是利用抗生素分子中的基团所具有的特殊反应或是特殊性质来测定其含量。其中以高效液相色谱法和联用技术最为常用。49711

（1）高效液相色谱法

    该法的过程引入气相色谱理论，技术上采用了高压泵，高效固定相和高度灵敏度检检测装置，检测步骤一般为：样品处理，残留药物分离，残留药物的检测。

    样品的提取一般使用水和酸化有机溶剂，两者可以同时达到脱蛋白和萃取残留的目的，这种方法对食品中青霉素的提取效果非常好。在得到的水提取液或有机提取液中，由于含有许多其它的共萃取物，所以目标检测物的浓度不高，所以为了降低干扰，提高灵敏度，需要利用离子交换，固相萃取和免疫亲合色此方法样品前处理简单、回收率高、实用性强、检验灵敏度高、重现性好、检测数据准确可靠。

（2）联用技术。

    各种分析技术联用是现代分析的一种趋势，它可以同时进行定性，定量，分离分析。色谱质谱联用检测法就实现了高效层析分离和检测联机，并且由于控制性好，特异性较强，灵敏度较高，重复性均好，所以在对食品中的青霉素类抗生素的分析检测上获得了广泛的使用[3]。质谱联用法测定牛奶中四环素，土霉素，金霉素和美他环素药物残留的方法，结果显示牛奶中四环素，土霉素及美他环素的检测限0.05ug/ml，金霉素0.1ug/ml；样品回收率为78.7%～90.2%，变异系数在2.4%～18.8%之间，方法检测限为0.02～0.05ug/ml。

2微生物检测技术

    微生物检测法是应用较为广泛的方法，测定原理是根据抗生素对微生物的生理机能产生的抑制作用，来对抗生素进行定性、定量确定样品中抗微生物药物残留。包括有：TTC法、纸片法（PD）和试纸法（STOP）。纸片法和试纸法这两种方法都属于传统的微生物检测方法，具有时间长、显色状态不明显、操作复杂等缺点。因此我国现在检测动物源性食品尤其是牛奶中抗生素残留的标准方法是TTC法。

    TTC是氯化三苯基四氮唑（tripheyetetrazoliumchloride），其在牛乳中的测定原理是：如果牛乳中有抗生素存在，当乳中加入菌种（嗜热链球菌）经培养后，菌种不增殖，此时加入的TTC指加入菌种后，嗜热链球菌就生长繁殖，在新陈代谢过程中产生的氢，使无色的氧化型的TTC还原成红色的还原型的TTC，使样品染成红色，即牛乳的颜色不变为阳性，染成红色为阴性。

3酶联免疫检测技术

    酶联免疫分析法（ELISA）属于免疫分析检测抗生素方法中的免疫测定法（immunoassays，IAs），它具有特异性好、灵敏度高、操作简便快捷、分析成本低、前处理简化、取样量少、容量大、仪器化程度低，分析数量级是高效液相色谱分析的几十倍以上，且可同时处理大批量样品等特点，所以在食品成分分析领域中前景极佳。目前大部分的抗生素（磺胺二甲基嘧啶、氯霉素、沙拉沙星、链霉素、四环素、莫能菌素等）建立了免疫测定法[4]。

    酶联免疫吸附分析是将抗原、抗体的免疫反应和酶的高效催化反应有机结合而发展起来的一种综合性技术。是通过化学的方法将酶与抗体或抗原结合起来形成酶标记物或通过免疫学的方法将酶与酶抗体结合起来形成免疫复合物(这些酶标记物或免疫复合物仍保持其免疫活性)论文网，然后它与相应的抗原或抗体反应形成酶标记的或含酶的免疫复合物(结合在免疫复合物上的酶)在遇到相应的底物时，催化其发生水解氧化或还原反应产生可测信号(形成有色的发光的或荧光的产物)，以此来进行定性定理是：利用在包被有偶联抗原的固相载体上加入待测抗原和一定量的抗体工作液，再加入酶标记抗抗体，形成间接竞争的关系，进行洗涤和显色后，测定吸光度值便可确定待测品中抗生素残留量。