从代谢产物中分离活性成分的方法主要有：纸层析法、薄层层析法、硅胶柱层析法等。纸层析法的载体为纸，一般固定相为纸纤维上吸附的水分，以不与水相溶的有机溶剂作为流动相。因为物质的极性大小不同,所以在两相中的分配比例也会有所差异。极性小的物质随有机相移动较快，在有机相中的分配较多；而极性大的物质移动相对较慢，在水相中分配较多, 从而将极性不同的物质分开。与其他方法相比，纸层析法具有：测样量大，准确度高，方便操作，需要的试剂、设备简单易得，成本低又快速等优点。本研究即采用纸层析方法初步分离抑菌活性物质。文献综述

我们在从内生真菌中筛选抗菌物质的过程中，发现一株内生真菌具有较强的抑菌活性，其代谢产物对多种耐药菌具有较好的抑制作用，具有开发成新抗生素的潜力。本研究将对成分活性进行初步分离，为进一步利用此菌株开发新型抗菌药物提供基础。

2材料与方法

2。1 菌株

本研究所用的菌株为本实验室筛选到的一株内生真菌菌株，现保存于江苏师范大学江苏省药食植物生物技术国家重点实验室内生真菌库中。细菌为18H5（携带NDM-1 β-内酰胺酶基因重组质粒的菌株），野生型大肠杆菌（Escherichia coli）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。

2。2 仪器

本实验所用仪器名称、型号、生厂厂家见下表

仪器名称             仪器型号                     生产厂家

霉菌培养箱           BMJ-250              上海博迅实业有限公司医疗设备厂

电子天平             BT-124S               北京赛多利斯仪器系统有限公司

旋转蒸发仪 真空泵    SHZ-D（III）          巩义市予华仪器有限责任公司

超净工作台           SW-CJ-1F              苏州安泰空气技术有限公司

恒温培养箱           DNP-9052             上海精宏实验设备有限公司

离心冷冻浓缩仪       LNG-T98              太仓市华美生化仪器厂

高压灭菌锅           LDZX-50KBS          上海申安医疗器械厂

恒温摇床             TCYQ                 太仓市实验设备厂

型磁力搅拌器         85-2                   上海司乐仪器厂

冰箱                 BCD-218UN            海信（北京）电器

型酶标仪             00038425                     /   

通风橱                  /                  上海飞茸科教设备有限公司

微孔过滤器              /                         /

2。3试剂 

马铃薯葡萄糖琼脂培养基（potato dextrose agar，PDA）：将土豆洗净去皮，精密称取200。0g，加水煮成汁30分钟，过滤后，加入葡萄糖30g，再加自来水至2000ml，搅拌均匀后，分装至十个锥形瓶中，每一个锥形瓶中都加入3。4g琼脂，加塞，灭菌备用。