1.4 车前多糖的国内研究概况
近代国内对车前子多糖的研究非常活跃,主要集中在车前子的形态、功能、药理作用等方面,从动物模型和临床运用等角度,开展了广泛而有意义的实验研究。张杰等用车前子对抗高脂血症大鼠脂质过氧化作用,可明显降低高脂血症大鼠血脂,增加机体抗氧化能力。王素敏等的研究发现,车前子在降低大鼠血清总胆固醇、三酰甘油和脂质过氧化物水平的同时,提高了超氧化物歧化酶活性。李兴琴等的研究表明,车前子具有调节血脂和保护高脂血症大鼠血管内皮细胞损伤的功能。王海珍研究发现车前超微粉对无水乙醇所致的胃溃疡有明显的保护作用和促进醋酸型胃溃疡的愈合,机理可能是通过增强胃粘膜的防御因素,改善局部血液循环,抑制脂质过氧化反应,清除体内过多氧自由基有关。万茵建立了以木糖作标准曲线,采用苯酚一硫酸法进行车前子多糖含量测定的方法。王勇等研究实验性晶状体氧化损伤所致晶体上皮细胞(LEC)凋亡及其凋亡小体形成,发现:车前子可明显抑制LEC凋亡,其显著抑制LEC凋亡的作用可能是其防止和延缓白内障发生发展的细胞学机制[14~17]。
1.5 本课题的研究意义及研究内容
1.5.1 研究意义
如今投入市场的众多药物大多为西药,虽药效显著,但多伴有副作用,或者容易产生抗体。相对来说,历史悠久的纯天然中药更加健康,且价格低廉,除作为复方药及使用外,经处理成为中成药后,更方便使用。
车前是中国传统中药材,具有清热利尿、祛痰、凉血、解毒的功效,现代多项研究表明其具有致污、护肝、降低血清胆、固醇等多项药理作用。车前多糖为车前子种皮外表细胞壁的黏液质,是一种亲水性胶体,也正是车前子中主要的有效成分。国内外对其研究较多,将车前子种皮或多糖制成各种保健食品,突出其润肠通便、降血糖、调节血脂等保健作用,并利用其流变、凝胶特性开发车前子胶类产品,广泛用于食品、药品行业。所以车前多糖的提取和纯化是很有应用价值的一个研究课题。
1.5.2 研究内容
本论文研究内容包括以下几个方面:
(1)标准曲线的建立:包括葡萄糖标准曲线和蛋白质标准曲线的建立。采用苯酚-硫酸法建立葡萄糖标准曲线,采用Folin-酚试剂法(Lowry法)建立蛋白质标准曲线。 (2)采用碱液热提的方法从车前中提取活性多糖,通过正交设计试验确定碱液热提车前多糖的最佳浸提工艺条件。 (3)研究确定车前多糖分离纯化的最佳工艺条件。首先,采用Sevag法脱蛋白。其次,采用氧化剂氧化脱色法进行车前多糖溶液的脱色,观察了脱色率和多糖损失率随氧化反应时间的变化。接着用DEAE-32离子柱层析进一步分离,最后再用Sephacryl S-400分子筛纯化,水洗得车前多糖。 (4)最后采用高效液相色谱分析法对PMP进行纯度和分子量的测定。
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