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（4）冷却、开阀放气，移去外盖，取出比色管并冷至室温。
（5）用无氨水稀释至50mL标线，混匀。 分别向各分消解液中加入1mL抗坏血酸溶液混匀，30s后加2mL钼酸盐溶液充分混匀
（6）室温下放置15min后，使用光程为30mm比色皿，在700nm波长下，以水作参比，测定吸光度。扣除空白试验的吸光度，从工作曲线上查的磷的含量。
（7）工作曲线的绘制：取7支具塞刻度管分别加入0.0，0.5，1.00，3.00，5.00，10.0，15.0mL磷酸盐标准溶液。加水至25mL。然后按以上步骤进行处理。以水做参比，测定吸光度。扣除空白试样的吸光度后，和对应的磷的含量绘制工作曲线。
2.3.5 氨氮的测定
1、适用范围：适用于地表水、地下水、生活污水和工业废水中氨氮的测定；当水样体积为50mL，使用20mm比色皿是，本方法的检出限为0.025 mg/L，测定下限为0.10 mg/L，测定上限为2.0 mg/L（均以N计）。
2、方法原理：以游离态的氨或铵离子等形式存在的氨氮与纳氏试剂反应生成淡红棕色络合物，该络合物的吸光度与氨氮含量成正比，于波长420nm处测定吸光度。
3、方法步骤
（1）校准曲线
在8个50 mL比色管中，分别加入0.00、0.50、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00和10.00 mL氨氮标准工作溶液，其所对应的氨氮含量分别为0.0、5.0、10.0、20.0、40.0、60.0、80.0和100 μg，加水至标线。加入1.0 mL酒石酸钾钠溶液（4.5），摇匀，再加入纳氏试剂1.0 mL，摇匀。放置10 min后，在波长420 nm下，用20 mm比色皿，以水作参比，测量吸光度。
以空白校正后的吸光度为纵坐标，以其对应的氨氮含量（μg）为横坐标，绘制校准曲线。
（2）样品测定
取样品5 mL，用水稀释至标线，按与校准曲线相同的步骤测量吸光度。
（2）空白试验
用水代替水样，按与样品相同的步骤进行前处理和测定。
（3）结果计算
水中氨氮的质量浓度按下式计算：
式中： ----水样中氨氮的质量浓度（以N计），mg/L；
-----水样的吸光度；
-----空白试验的吸光度；
-----校准曲线的截距；
-----校准曲线的斜率。
-----试料体积，mL。
2.4 试验仪器与试剂
2.4.1 试验仪器
1、 BXM-30R立式压力蒸汽灭菌器LS-30 产品编号012-B4090 上海东亚压力容器制造有限公司制造
2、 紫外可见分光光度计 UV BlueStar A 京制：0000113号03 北京莱伯泰科仪器有限公司
3、 磁力加热搅拌器：79-1 型编号440 出厂 89年7月
4、 可见分光光度计：722N 出厂编号：7070309095 上海精密科学仪器有限公司
5、 散射光浊度仪：SZD-1型上海自来水给水设备工程公司
6、 电子天平：ISO9001 京制00000246号赛多利斯科学仪器（北京）有限公司
7、 梅宇牌 MY3000-6J智能型混凝试验搅拌仪浙江市梅宇仪器有限公司
8、 PH复合电极 E-201 新型（出口型号：MODEL E-331）
9、 移液枪：KE0054092 (1毫升)
10、移液枪：DX95265 (5毫升)
比色皿（ 石英Q），玻璃比色皿，50mL酸式滴定管，冷凝回流装置，10mL、20 mL、25 mL移液管，250mL锥形瓶，25 mL、 50 mL比色管，50 mL、100 mL量筒，1000 mL烧杯，100 mL、1000 mL容量瓶，玻璃棒，胶头滴管，温度计等。