2×Taq Mix                      10

     Forward primer (10uM)                 1

     Reverse primer (10uM)                 1

           DNA                          2

          ddH2O                         6

           Total                          20

PCR扩增反应的程序为：

94°C                    3min

94°C                    30sec

58°C                    30sec

72°C                    1min

72°C                    5min

16°C                    Hold Forever

3。3 电泳

配胶：先称量5g琼脂糖再用量筒取100ml缓冲液，先后移入专用锥形瓶，微波炉中加热2。5分钟两次，加入染液。均需摇匀，拿放需带防护手套小心烫伤。

安装：在使用凝胶床之前我们先要把凝胶床洗干净，晾干，放在工作台上，切记工作台需要水平，在这之后插上样品梳。

    灌胶：将琼脂糖溶液轻轻倒入凝胶床上确保在倒入凝胶时溶液中没有气泡，等待20分钟琼脂糖胶会完全凝固，再拔出梳子，在这之后向电泳槽内加入电泳缓冲液。

    加样：用20μL移液器将PCR产物加到样品槽中，且加Mark做标准，切记每一行之前都要添加Mark，再向每槽加10-20μL产物，记录样品的点样次序和加样量。

    电泳：安装好电泳仪之后，把其电压调整至220V，接下来进行电泳，电泳15-20分钟，10分钟之后每2分钟前去观察一次，当溴酚蓝移到距凝胶前沿1-2cm时，就可以停止电泳来进行扫胶了。

    染色和观察：取出凝胶稍微冷却一会儿防止凝胶过热而导致机器自动关机，当凝胶温度不在烫手后放入机器照射，电脑中图像分析并标记点样序号和样品名及引物，操作时必须戴手套。