[5-7]。我国每年都有因Cd污染而引起的农作物减产或污染事件[8]。据研究[9],重金属 Pb、Cd等是一类主要的环境毒性因子,对植物有明显的毒害与诱变作用,不同浓度Pb、Cd对小麦幼苗生长代谢及小麦植株中过氧化氢酶和淀粉酶活性的影响不同。目前,有关重金属单一及复合污染对植物影响的研究,多集中在一些大田作物、蔬菜和牧草上[9],而有关重金属对杂粮的影响研究[10]不多,特别是蚕豆对UV-B辐射和铅镉胁迫的响应研究更是鲜有报道。本实验以蚕豆为材料,研究UV-B辐射和Pb+Cd(复合胁迫)处理下,蚕豆幼苗期根系和叶片生理指标的变化,旨在探明UV-B辐射和铅镉重金属胁迫对蚕豆的毒性影响,为开展UV-B辐射和重金属污染蚕豆的生物监测提供依据,也为我国蚕豆的优质栽培提供科学依据。

1. 材料与方法

1.1 实验材料

   市售普通蚕豆。  
1.2 实验方法

1.2.1 铅镉胁迫液的制备

①精密称取803.50mg硝酸铅(优级纯),加10mL 1.0mol/L的硝酸,全部溶解后移入1000mL容量瓶中,加水至刻度,此溶液铅浓度为500mg/L。
    ②精密称取40.62mg氯化镉(优级纯)于300mL烧杯中,加水溶解,全部溶解后移入1000mL容量瓶中,加水至刻度,此溶液镉浓度为20mg/L。

1.2.2 种子处理[11-12]

选取大小一致的蚕豆种子,氯化汞消毒15~20min后,用无菌水清洗,然后等分为4组备用。

1.2.3 实验处理设计

实验设置4个组,第1组设为对照组,放入盛有适量水的培养皿中;第2组等分为3份,分别照射紫外线1d、3d、5d;第3组等分为3份,分别在铅镉溶液中浸泡1d、3d、5d;第4组同样等分为3份,分别在UV-B辐射和铅镉溶液复合胁迫下处理1d、3d、5d。第2组、第3组、第4组处理结束后,进行根尖细胞恢复培养。
幼苗处理:分别选出能正常发芽的种子,待幼苗长出4~6片真叶时,用上述4个组的处理方法处理蚕豆幼苗,处理结束后使幼苗恢复生长2d,然后进行幼苗期各个生理指标的测定。

1.2.4 项目测定

①发芽率的测定:种子经过处理后,进行萌发实验,每天观察1次发芽情况,统计各个处理萌发1d、3d、5d后的发芽率。
②根系活力的测定[13]:种子萌发8d后采用TTC法进行根系活力的测定。
③可溶性蛋白含量的测定[14]:采用考马斯亮蓝G-250比色法测定。
④叶绿素含量的测定:采用苏正淑[15]等的方法进行测定。
⑤丙二醛含量的测定[16]:采用硫代巴比妥酸(TBA)法测定。
⑥过氧化物酶活性的测定[17]:采用愈创木酚比色法测定。

2. 结果与分析

2.1 铅镉溶液、UV-B辐射、复合胁迫对蚕豆种子萌发的影响

表1  铅镉、UV-B辐射及复合胁迫下蚕豆的种子萌发率
处理组   处理时间  
1d 3d 5d
CK 100% 100% 100%
Pb+Cd胁迫 100% 98% 98%
UV-B辐射胁迫 94% 90% 88%
复合胁迫 96% 88% 84%
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