3、浸提：在刻度试管中加入10ml混合液，使被切碎的叶片浸入其中，然后将试管封住；立即将其放入避光条件的恒温培养箱中（25℃），直至细丝完全变白为止（过夜即可）。中间轻轻摇晃几下，可以缩短提取时间[11]。

4、比色：为防止溶剂挥发造成误差，用混合试剂重新定容至10mL；晃匀后，将管内溶液倒入比色皿；空白组中加混合液，在663nm、645nm下，在加入提取液后的5~20min内测定叶绿体色素提取液的光吸收值，并记录。

5、计算：首先计算提取液的叶绿素浓度（C v，mg/L）。Chl a=12。7OD663-2。69OD645；Chl b=22。9OD645-4。86OD663；C v=Chl a+Chl b。然后按下面公式计算出以单位叶面积表示的叶绿素含量（mg/dm2）：CA=Cv1/1000*10*100/S=CV/S。其中A面积，v表示体积，S为用于提取叶绿素的叶片面积（cm2）。

2。2。3  叶绿素荧光参数的检测文献综述

叶绿素荧光参数是一组用来描述植物光合作用机理和光合生理状况的变量或常值，其测定具有快速、损伤小的特点，所以被人们视为研究光合作用与环境关系的内在探针，在对植物光合作用研究上的应用日益广泛。

1、检测前，检查荧光检测仪是否损坏、各部分是否正确连接以及检测结果是否正确。

2、叶片处理：在自然光照良好的情况下，首先选取生长状况良好、长势相当的叶片，用暗适应夹夹住（夹叶片前，先将暗适应夹的滑片推至关闭状态），暗处理20~30min；不需要暗处理的叶片用暗适应夹夹上后立即检测（滑片为打开状态）。

3、测定：开机后，按“EXP”进入选择实验程序界面；然后按“Next”，直到找到实验所需的程序，按“OK”确认。选好程序后，把光纤适配器与暗适应夹连接好，并按照正确的方式放置好；按 “RUN” 运行，即可读数，按“Yes”保存数据，并记录[12, 13]。

2。2。4  花生种子蛋白质含量的测定

1、烘干：将收获的花生每个品种取适量，烘干前后分别进行称重，烘干后将不同的花生品种打碎至于大培养皿中继续烘干至恒重，备用。