摘 要：本文以实验室从加拿大一枝黄花叶片中筛选的一株黑附球菌为实验材料，对该菌 发酵产物进行鉴定，探索高产果胶产物发酵培养基组分并对其单糖组分进行了初步鉴 定。结果表明菌株 L1 的发酵产物为果胶，麦芽培养基为其最适发酵基础培养基。利 用多种碳源和氮源配置不同条件的大麦芽培养基，通过分析果胶产量和菌丝体生成量 确定实验室中最佳培养基配方为大麦芽 20.0 g，木糖 25.0 g，酵母浸膏 2.0 g，蒸馏水

1000 mL；在工业生产中，可用 1 g/L 的花生饼粉代替 2 g/L 的酵母浸膏以获得更高的 果胶产量。利用柱层析法和薄层色谱法，初步鉴定该果胶半乳糖醛酸聚合体主链上的 单糖组分为葡萄糖、甘露糖和鼠李糖。

关键词：加拿大一枝黄花；果胶；发酵；培养基组分；优化；单糖组分

Abstract：In this paper, using an endophytic fungus identified Epicoccum Nigrum which was extracted from the leave of Solidago Canadensis L. as material, the fermentation product was identified, the fermentation medium components of high yield pectin and monosaccharide components of pectin were explored preliminarily. Results showed that the fermentation product of strain L1 was pectin and the malt medium was the optimal medium for its fermentation. Making various malt mediums with different carbon sources and nitrogen sources, the optimal medium in lab is 20.0 g malt, 25.0 g xylose, 2.0 g yeast extract in 1000 mL distilled water. In order to get a higher yield in industry, 1 g/L peanut meal can be used to substitute 2 g/L yeast extract in optimal medium. Glucose, mannose and rhamnose were found in the galacturonic acid polymer of the pectin by column chromatography and thin layer chromatography (TLC) detection method.

Keywords: Solidago Canadensis L.; Pectin; Fermentation; Medium Components; Optimization; Monosaccharide Composition

目 录

第 1 章 绪论1

1.1  植物内生菌 1

1.1.1  植物内生菌的分类1

1.1.2  植物内生菌的功能2

1.1.3  植物内生菌的应用3

1.2  加拿大一枝黄花 3

1.2.1  危害 ·3

1.2.2  利用 ·4

1.2.3  研究 ·5

1.3  果胶 5

1.3.1  果胶结构 ·6

1.3.2  果胶来源 ·6

1.3.3  果胶应用 ·7

1.4  实验目的与意义 7

第 2 章 材料与方法 9

2.1  实验材料 9

2.2  主要仪器及设备 9

2.3  主要试剂 9

2.4  培养基 ·10

2.5  菌种活化 ·10

2.6  发酵产物的鉴定 ·10

2.7  基础培养基筛选 ·11

2.7.1  可溶性糖含量的测定11

2.7.2  果胶含量的测定 12

2.7.3  菌丝体含量的测定12

2.8  培养基组分优化 ·13

2.8.1  最佳碳源的筛选 13

2.8.2  最佳氮源的筛选 13

2.8.3  不同浓度碳源和氮源的确定 ·13

2.9  产物单糖组分的初步分析 · 14

2.9.1  柱层析法分离纯化 14

2.9.2  样品的制备 14

2.9.3  薄层色谱 15

第 3 章 结果与讨论 ·16

3.1  发酵产物红外光谱 ·16

3.2  基础培养基的筛选 ·17

3.2.1  培养基中可溶性糖含量变化 ·17

3.2.2  培养基中果胶含量 19

3.2.3  菌丝体含量 20

3.3  培养基组分优化 ·21

3.3.1  碳源的选择 21

3.3.2  氮源的选择 22

3.3.3  不同浓度碳源条件 24

3.3.4  不同浓度氮源条件