热胁迫下味精对果蝇寿命的影响及正常温度下味精对果蝇生殖影响(2)
电子天平（奥豪斯仪器（上海）有限公司 ）
电子万用炉（北京市永光明医疗仪器厂）
10ml量筒，烧杯（1000ml，500ml,50ml）若干，150ml锥形瓶若干，玻璃棒，胶 头滴管。
1.2材料处理
1.2.1基础培养基的配制
药品（200ml） 蔗糖 玉米粉 酵母浸粉 水 琼脂粉 丙酸
剂量 13g 17g 3g 200ml 1.5g 1ml
以上是200ml培养基的配方。分别称取表中的材料（丙酸除外），倒入不锈钢锅里，在电子万用炉上加热，边加热边用玻璃棒不停地搅动，待培养基沸腾后关火，培养基冷却至室温时加入丙酸，搅匀备用。
1.2.2实验培养基的配置
此次实验分为3个浓度梯度，分别为0.01%、0.1%、1%[6]，每个浓度梯度设置3瓶，另设一空白对照组，也是3瓶。实验分2批，每批次4组，3组实验1组对照。按每组400g培养基分别称量精0.04g、0.4g、4g。取一500ml的空烧杯，放在电子天平上清零，称量400g基础培养基，然后倒入0.04g称量好的精，用玻璃棒迅速匀速搅拌。然后依次配好浓度为0.1%和1%的培养基，空白对照组不需要加精。以上操作保证培养基还有余热，未凝固。
1.2.3倒培养基
在标签纸上写上培养基浓度和序号，依次贴在空的锥形瓶上。配置完成后，趁着培养基还有余热未凝固，迅速倒入贴好标签的空锥形瓶，每瓶大概倒入50ml，注意锥形瓶斜着倒，可用玻璃棒引流。倒进锥形瓶中后，保持锥形瓶倾斜角度，等待培养基冷却凝固。以上操作保证动作迅速，防止未倒瓶前培养基凝固。
1.2.4撒酵母粉
等待培养基冷却凝固后，依次在各个培养基上撒上食品级活性酵母，目的是防止果蝇粘在培养基上和加入酵母菌使其迅速繁殖为果蝇提供食物。
1.2.5果蝇的收集
用香蕉皮放在野外吸引果蝇，待其大量聚集后用干净的塑料袋搜集果蝇，把塑料袋的袋口系上，不要太紧，防止其死亡。
1.2.6果蝇的处理
把一部分果蝇转入培养基瓶中饲养，等待果蝇产卵后，把瓶中果蝇转移，瓶中只剩果蝇卵。待卵孵化后同步化培养。等其蛹化后备用。
1.3实验方法
1.3.1果蝇转瓶
用搜集野生果蝇的塑料袋对准空的锥形瓶，一手捏紧塑料袋和锥形瓶的接口处，一手拿好锥形瓶。把塑料袋朝下，放在相对黑暗的地方，锥形瓶朝上，利用果蝇趋光性使之从塑料袋向锥形瓶飞去和爬去。一瓶里面搜集适量果蝇后，一手把锥形瓶往桌面移动使瓶子倒扣在桌子上；另外一只手捏紧塑料袋，不让果蝇飞走。然后重复几次，搜集几瓶果蝇，足够后续实验的使用量。
取一瓶同步化孵化后8小时内的果蝇，移开棉花赛，将另一个空的锥形瓶与其重合，空瓶朝上，装有同步化果蝇的瓶子向下，把下面的瓶子置于相对黑暗的环境中，上面的空瓶置于相对明亮的环境中，利用果蝇的趋光性使其向上面的瓶子转移。一次不用搜集太多，搜集完成后一手把上面的锥形瓶往桌面移动使瓶子倒扣在桌子上；另外一只盖住下面的瓶子，不让果蝇飞走。再取一个空瓶重复上面的转瓶操作。
倒扣的瓶子缓慢从桌面向边缘移动，迅速用棉塞将瓶口塞上。然后将瓶子倒过来，瓶口朝上放在桌上备用。
1.3.2果蝇的麻醉
取一个新的棉塞，用胶头滴管在棉塞上滴上5-6滴乙醚。取一瓶转移好的果蝇，迅速倒扣锥形瓶并抽出棉塞，把锥形瓶扣在桌面上，倒扣的瓶子缓慢从桌面向边缘移动，迅速用滴了乙醚的棉塞将瓶口塞上，再将锥形瓶倒过来，瓶口朝上，静置2-3min，等果蝇全部昏迷并掉在瓶底时即可进行实验。
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