产硫酸软骨素类多糖细菌的鉴定与诱变(2)
3.3 细菌的紫外诱变 19
3.4标准曲线的绘制 22
3.5 多糖含量的测定 23
3.6 发酵条件的优化 23
4 结论及展望 25
致谢 27
参考文献 29
1 前言
1.1 硫酸软骨素概述
1.1.1 硫酸软骨素
硫酸软骨素（chondroitin sulfate；硫酸软骨素）是连接在蛋白质上形成蛋白聚糖的一类糖胺聚糖，存在于软骨、腱、韧带和主动脉等组织的基质中。基本结构为葡萄糖醛酸和N-乙酰半乳糖胺（又称N-乙酰氨基半乳糖），双糖单位之间由β～1，4苷键连接。由于硫酸基团在半乳糖上的位置和多少的不同而分为4-硫酸软骨素 (硫酸基团在半乳糖的第4位c上 )，6-硫酸软骨素(硫酸基团在半乳糖的第6位c上)。其基本结构单元见图1-1，实际上多数硫酸软骨素都是4-硫酸和6-硫酸二糖单位的共聚体。
图1.1-1 硫酸软骨素结构式
硫酸软骨素的物理性质为：分子量在5000~30000之间， 一般含有20~60个双糖单位，是一种高分子化合物。 成品为白色或微黄色粉末；略带咸，无臭，易溶于水，在乙醇、丙酮或冰醋酸中不溶；水溶液具粘稠性，加热不会凝结。
硫酸软骨素广泛存在于一些动物如鱼、牛、羊、鸡等软骨组织中，其中4-硫酸软骨素在哺乳动物的软骨中含量很高，也是机体其它组织的天然组成成分，而6-硫酸软骨素则主要存在于鱼类的软骨中。
1.1.2 硫酸软骨素的药理及保健作用
（1） 硫酸软骨素的药理作用：
因硫酸软骨素具有降血脂、抗凝血、 抗肿瘤、促进冠状动脉循环和防止血管硬化等生物活性，在抗凝血及抗血栓、调节血脂及抗动脉粥样硬化、抗炎及保护骨关节、调节细胞黏附作用、抗过敏及免疫调节、阻碍血管生成、抗氧化、抗纤文化和调节神经生长中发挥重要作用[1]。在抗肿瘤作用、抗粘连作用、促进细胞增生方面也有很大成效 。人类可使用硫酸软骨素治疗骨关节炎、牛皮癣、动脉粥样硬化、炎症性肠病和自身免疫性疾病。因此硫酸软骨素在临床上有多种用途 。
（2）保健及其他用途：
硫酸软骨素为结缔组织中天然存在的成分，能够结合水分子用于润滑和支撑关节，使关节活动自如。 在国外上市的硫酸软骨素或以硫酸软骨素为主要原料的制剂很多，作为膳食补充剂用于保护关节。
硫酸软骨素与顺铂合用减少肾毒性,硫酸软骨素也可延长消毒抗菌时间以及净化病毒。硫酸软骨素也可用于生物膜的构建、人工骨或软骨的构建、活性脚手架的构建、人工真皮的构建。
硫酸软骨素 作为生物药物，取材安全，方便，且生物活性高，副作用小，具有很大的应用市场。
1.1.3 国内外研究现状概述
1.2 枯草芽孢杆菌概述
1.2.1 枯草芽孢杆菌
枯草芽胞杆菌，是芽胞杆菌属的一种。单个细胞0.7~0.8×2~3微米，着色均匀。无荚膜，周生鞭毛，能运动。革兰氏阳性菌，芽孢0.6~0.9×1.0~1.5微米，椭圆到柱状，位于菌体中央或稍偏，芽孢形成后菌体不膨大。菌落表面粗糙不透明，污白色或微黄色，在液体培养基中生长时，常形成皱醭。需氧菌。生长温度：最高温度45－55℃；最低温度 5－20℃。 可利用蛋白质、多种糖及淀粉，分解色氨酸形成吲哚。在遗传学研究中应用广泛，对此菌的嘌呤核苷酸的合成途径与其调节机制研究较清楚。广泛分布在土壤及腐败的有机物中，易在枯草浸汁中繁殖，故名[5]。