不同地区的稗草种群对五氟磺草胺敏感性差异(2)
稻田杂草化学防除具有省工、省时、高效、快捷等优点，是提高劳动生产率、展高效与优质农业的重要措施，是稻田杂草综合治理策略中最重要的手段[5]。我国水稻生产主要采用化学除草剂控制杂草危害，但对化学除草剂的过度依赖和长期使用导致水稻田杂草抗药性发展迅速，抗药性杂草治理问题日益突出，倍受关注[6]。五氟磺草胺属三唑并嘧啶磺酰胺类化学除草剂，通过抑制敏感杂草乙酰乳酸合酶 (ALS)，造成支链氨基酸代谢障碍，从2004年开始应用于生产以来，已经连续使用10多年，长江流域水稻田稗草对其敏感性下降的现象时有报道，有研究表明稗草乙酰乳酸合酶作用位点发生变化是其对五氟磺草胺产生抗药性的主要原因[7]。但关于五氟磺草胺胁迫下不同敏感性稗草生理响应的报道还不多见，为此，本研究以采自5个地区的不同稗草为材料，通过整株生物测定明确它们对五氟磺草胺的敏感性差异，并探讨了五氟磺草胺胁迫下不同地区稗草在叶绿素荧光参数、光合气体交换、光合关键酶Rubisco活性等方面的生理响应，旨在为稗草抗药性的预测积累基础，为生产上稗草治理和化学除草剂精准使用提供依据。
2实验材料与设计
2.1 实验材料
稗草：上海奉贤庄行镇稗草（以符号SH代替）、浙江绍兴稗草（以符号SX代替）、安徽潜山稗草（以符号QS代替）、江苏南京稗草（以符号NJ代替）、湖北武汉农科院稗草（以符号WH代替）。
药剂：25克/升五氟磺草胺油悬浮剂（美国陶氏益农公司生产）。设计剂量分别为0、3.75、7.5、15、30、60 g a.i. /hm2（表示克有效成分/每公顷）。
2. 2 实验设计
分别在直径6.5cm塑料杯（泥炭：蛭石=1：1，底部打孔吸足水分）中播入25粒稗草种子，覆盖0.5 cm浅土层，于自然条件下生长至两叶一心时定苗（10株/杯），三叶期按照设计剂量进行供试药剂喷雾处理。喷雾采用农业部南京农业机械化研究所生产的3WPSH-500D型生测塔喷雾，圆盘直径50cm，主轴转动速度6转/min，喷头孔径0.3mm，喷雾压力0.3MPa，雾滴直径100μm，喷头流量90ml/min。每处理喷液量为675kg/hm2，同时设清水空白对照。每处理重复4次。
2. 3 测定指标
2. 3. 1 叶绿素（SPAD值）测定
每组选取成熟的10株稗草植株，于喷药后2、4d，通过SPAD-502便携式叶绿素计（日本Minolta公司SPAD-502便携式叶绿素计）测量稗草的叶绿素含量。
2. 3. 2 光合参数测定
于喷药后2、4d晴天上午9点到11点半，用光合系统分析仪测定稗草净光合速度（Pn）、气孔导度（Gs）、胞间CO2浓度（Ci）和蒸腾速度（Tr）（美国LI-COR公司LI-6400便携式光合测定仪，天气晴朗，上午9:00-11:30测定），重复四次。测量条件为：自然CO2浓度（380ppm），红蓝光源（LI-6400-02B LED），光有效辐射强度为1000μmol*m-2*s-1。
2. 3. 3 叶绿素荧光参数测定
于喷药后第4d，取稗草叶片，暗适应30min后，用叶绿素荧光成像系统测定稗草叶片的最大光化学效率Fv/Fm（英国Hansatech公司，Handy PEA）。
2.3.4 Rubisco 活性测定
于喷药后第4d，随机选择4片稗草，参考Zhang等[8]的方法测定。
2.3.5 整株生物活性测定
喷药后21d，取未实验过的稗草叶片测定地上部分计算鲜重，根据数据，用Excel计算鲜重防效，并利用其自带的y=aln(x)+b数学模型拟合出药剂浓度(或剂量)与抑制百分率或鲜重防效之间的对数曲线方程，得到决定系数R2，再求取ED90和95%置信区间。
2.4 数据分析
采用SPSS22.0软件对试验数据进行统计分析，Duncan新复极差法进行差异显著性检验(α=0.05)。