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盐胁迫对甘薯根系生理及H+、K+、Na+离子动态平衡影响的初步研究(3)
1.2.3超氧阴离子单位时间生成速率的测定
1.2.3.1实验试剂
1、50mmol/L磷酸缓冲液(PH=7.8)
2、1mmol/L盐酸羟胺
3、17mmol/L对氨基苯磺酸(以冰醋酸:水=3:1)
4、7mmol/L α-萘胺(以冰醋酸:水=3:1)
5、50nmol/ml亚硝酸钠 母液
1.2.3.2实验步骤
1、称取样本0.3g研磨,加入3ml磷酸缓冲液,然后加入到离心管中,将离心管放入离心机当中去,离心机的转速需要将它设置为15000转每分钟,离心过程的温度是4℃,然后离心,时间为20分钟,离心之后我们取上清液,这就是实验所需的样本提取液。
2、取0.5ml样本提取液,加入0.5ml盐酸羟胺,在25℃下静置1h。
3、静置之后,取对氨基苯磺酸,体积1毫升,取α-萘胺,体积也是1毫升,将它们都加入到样本提取液中,然后让其自然显色,条件温度是25℃,时间为20分钟,然后在分光光度计中测量吸光度,条件是530nm。
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