硫酸软骨素发酵工艺研究+文献综述(2)
3.4发酵培养基、条件优化,23
3.5硫酸软骨素微生物发酵含量.,28
3.6动物法测定硫酸软骨素含量.,28
3.7两种实验法中硫酸软骨素含量分析..28
4.致谢.28
参考文献29
硫酸软骨素发酵工艺研究
1 引言
作为一种天然产物，硫酸软骨素有着良好的市场前景。它具有优异的生物活性，且无毒副作用；具有保水性、保胶性和高粘性，已被广泛用于药品及功能性食品、化妆品添加剂。目前国内硫酸软骨素需求量日益俱增，市场上主要作为保健食品出口菲律宾、日本、澳大利亚等国家和地区，是市场急需的走俏商品。预计国内年出口硫酸软骨素钠原料量达1000 t以上，但相当部分外贸出口公司却不到质量合格的产品。中国是畜牧业大国，全国各地猪、牛、羊等饲养量、屠宰量都居世界首位，产品原料来源广泛，具备硫酸软骨素的生产条件.硫酸软骨素是蛋白多糖的组成成分之一，是动物性粘多糖中的代表物质，分布在动物的喉骨、鼻骨，骨腱，韧带和腿骨等组织中，由D-葡萄糖醛酸和Ⅳ-乙酰．D一氨基半乳糖连接而成的一种高分子化合物，由于硫酸基团在半乳糖上的位置和多少不同分为硫酸软骨素A、B、C、D及E等，其中常见的是CHS．A和CHS．C⋯。硫酸软骨素具有抗炎症、抗肿瘤及降血脂等生理活性心J。目前国内主要从猪、牛、鸡等畜禽动物软骨中提取CHS∞引，水产品主要以鲨鱼、鳐软骨等为原料，国外也有研究人员从鱿鱼、贝类等软体动物中提取CHS，但原料不易获得，成本高，而从常规动物骨组织中提取CHS，仅见汪敏等人的研究。主要方法介绍如下：
Elson.Morgan法 Elson．Morgan法部颁药品标准采用Elson-Morgan法测定CS含量，根据cs水解所得氨基葡萄糖与乙酰丙酮发生缩合反应，其产物与对二甲氨基苯甲醛的酸醇溶液呈红色，测定525舢波长处吸光度。谢继青等认为影响测定的主要因素是乙酰化和显色，对该方法进行了优化。李萍等对测定的时间条件进行了研究，分析时间比原方法缩短一半以上。曾正宏、魏莉分别用该法测定了角膜宁滴眼液及复方硫酸软骨素片中CS含量。
间苯三酚法 cs在酸性条件生成糠醛或其衍生物，与间苯三酚试剂反应，产物在554 nm波长处有最大吸收。张华臻等进行了操作条件的优化，测定了角膜宁滴眼液中CS含量。
4-氨基-3-肼基-5巯基-1，2，4-三唑(AHMT)法 AHMT作为显色剂，与己糖醛酸或Cs显色灵敏。AHMT在碱性溶液中与cs生成紫色衍生物，在540 nnl波长处测定吸光度可测定cS的含量。刘坤等利用该法测定了软骨鱼类中cs的含量，并优化了测定条件。
阳离子染料法 阳离子染料带正电荷，与cs的硫酸基和羧基作用生成复合物，在特定波长处随cs浓度的增加吸光度降低。高贵珍等115一利用cs与天青A作用，在625岫波长处测定了中药复方制荆中Cs的含量。施文健等将cs与碱性艳蓝BO反应，在570 nm波长处浏定了CS含量。杜美菊等。将中性红作为光谱探针。在533 nm波长处测定了康得灵复方片中cs的含量。陈嫒嫒等[181将文多利亚蓝B与cs反应，在614 nm波长处测定了康得灵注射液中cs含量。丁雅勤等将吖啶橙作为光度探针与Cs反应，在492nm波长处测定了Cs含量。李明明等将结晶紫与Cs相互Way等在207nm波长处用尺寸排阻色谱法测定了营养品中cs含量。孙凌云等用示差折光枪测器在210nm波长处测定了cs的重均分子量、数均分子量及其分布。陈杰等用示差折光检测器在210nm波长处测定了硫酸软骨素注射液中小分子杂质含量，同时串联二极管阵列检测器考察了各组分的纯度和组成。
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