图清单

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图3-1 miR-432基因的溶解曲线 7

图3-2 18s基因的溶解曲线 8

图3-3 miR-432基因的扩增曲线 8

图3-4 18s基因的扩增曲线 9

图3-5 miR-432基因在湖羊成年羊各组织的表达水平图 10

表清单

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表2-1 实验仪器 2

表2-2 荧光定量PCR的反应体系 4

表3-1 RNA浓度纯度 5

表3-2 miR-432基因在湖羊成年羊不同部位的表达量 6

1前言

湖羊在中国太湖平原的饲养历史悠久，是重要的家畜之一[1]，作为绵羊品种之一，更是中国重点的保护品种[2]。在畜牧学上将湖羊分为羔皮和肉食绵羊兼用的粗毛羊，为稀有白色羔皮羊品种。由于湖羊太湖平原的自然条件的影响下和人为选择的情况下，逐渐形成一个特有的品种：具有性成熟早、在四季都可以发情，分泌乳汁的性能好，一年内可以分娩二胎，每胎还可以生育多羔，并且其生长发育的速度快，另外在经过改良之后有比较好的产肉能力。湖羊是的多胎繁殖能力已经驰名世界，农业部曾经在2000年和2006年先后两次将绵羊列入《国家畜禽遗传资源保护目录》。

microRNA是一类非编码的小分子RNA，大约有22个核苷酸左右RNA，近年来的研究发现，它可以利用与目标 mRNA的3'UTR 结合的途径导致mRNA降解以及阻遏此mRNA的翻译，从而达到抑制该基因的表达量的效果[3]。miRNA的成熟都要经过核酸酶的酶切、加工，去除较长的初级miRNA上的多余部分。由RNA诱导的沉默复合体之中就包含有成熟的miRNA，他可以通过碱基互补配对的原则来辨认目标mRNA，并根据两者互补程度的不同来指导沉默复合体选择性的进行目标mRNA的降解或者阻遏目标mRNA向蛋白质的翻译过程。

目前只有很少的一些miRNAs的生物学功能得到了阐明。由相关文献可知[4]，miRNA能够参与乳腺、肌肉、皮肤毛囊的发育并且可以影响繁殖机能。成熟的 miRNAS与相关蛋白形成 RNA 诱导的沉默复合( Risc) ，结合到有互补序列的 mRNA上，抑制该 mRNA 的翻译或者使其降解论文网，从而实现对基因表达的转录后调控作用[5]通过分析基因组上的miRNA位点，可以知道miRNA在动物的发育、疾病的产生中起到了非常关键的作用。一系列的研究表明：miRNA在细胞生长和凋亡，血细胞分化，同源异形盒基因调节，神经元极性，胰岛素的分泌，大脑形态的形成，心脏的发生，胚胎后期的发育等过程中发挥了重要作用。                          

本实验研究的是miR-432在湖羊成年羊不同组织中的表达差异，miR-432是miRNA的一种，其序列miR-432 MIMAT0001416 UCUUGGAGUAGGUCAUUG GGUGG。目前一些关于miR-432的研究：miR-432调控病毒在细胞内的增殖、miR-432通过作用于靶基因进而影响肌纤维类型。而还没有关于miR-432在湖羊不同组织内的表达差异及其影响的研究。