里氏木霉是一种嗜热丝状腐生真菌，是多细胞的真核微生物，隶属于丛梗孢目木霉属。作为工业菌株用于生产分解不同植物材料的酶类。被广泛应用于生产食品、饲料、纺织、制浆和造纸等行业用纤维素和半纤维素酶。里氏木霉的菌落呈广铺的棉絮状，起初为白色致密的平坦菌丝，而后边缘出现浅绿的产孢子丛束区，反面无色。分生孢子梗菌丝的短侧枝，多分枝，多为椭圆形或长方形，透明，壁光滑，成堆时绿色。

里氏木霉所产生的一种主要的纤维酶一纤维二糖水解酶I，由单拷贝基因编码，其产量可达里氏木霉胞外分泌性蛋白总量的50%[5]。因此，在对里氏木霉的遗传改造中，常利用纤维二糖水解酶I的启动子与终止子序列构建载体，并利用纤维二糖水解酶I的前导肽序列引导重组蛋白进行分泌性表达。里氏木霉具有极好的合成蛋白和分泌蛋白的能力；并具有真核的分泌机制，很可能还具有与哺乳动物系统相似的蛋白修饰性能。

2 里氏木霉产纤维素酶的诱导剂的研究

2.1材料与仪器

菌种：

里氏木霉Rut C-30：淮阴师范学院生命科学学院实验室保藏

原料：

马铃薯、琼脂、无菌水

预处理的秸秆、玉米浆购于淮安市百麦绿色生物能源有限公司

葡萄糖、硫酸铵、尿素、乳糖、低聚木糖、酒石酸钾钠、苯酚、偏重亚硫酸钠、柠檬酸购于国药集团化学试剂有限公司，分析纯AR

3，5-二硝基水杨酸（DNS）购于国药集团化学试剂有限公司，化学纯CP

硫酸镁、氯化钙、硫酸亚铁购于无锡市亚威化工有限公司，分析纯AR

磷酸二氢钾、氯化钴购于中国医药（集团）上海化学试剂公司，分析纯AR

硫酸锰购于上海试剂二厂，化学纯CP

氢氧化钠购于南京化学试剂有限公司，分析纯AR

仪器：源Y自:优尔W.论~文'网·www.youerw.com

超净工作台：HDL APPARATUS

恒温振荡箱：哈尔滨市东联电子技术开发有限公司

恒温培养箱：哈尔滨市东联电子技术开发有限公司

台式低速离心机：Eppendorf centrifuge 5418

恒温水浴锅：上海精密实验设备有限公司

p H 计：上海精科

立式电热压力蒸汽灭菌器：日产

光栅分光光度计：上海元析仪器有限公司

2.1.1 PDA培养基

马铃薯葡萄糖培养基是一种用来培养真菌的半合成培养基。此培养基是由马铃薯，葡萄糖，琼脂等组成。其中马铃薯煮汁可以提供碳源，氮源，无机盐和维生素等，葡萄糖主要作为碳源，琼脂为凝固剂。马铃薯的表皮中含有龙葵碱的化学成分，对菌丝生长有抑制作用，所以马铃薯在使用时要去皮。在PDA培养基上大多数真菌都可以良好生长。由于多数真菌喜欢偏酸性环境，而培养基灭菌过程中部分糖类会转化为酸，所以一般不需要调pH值。马铃薯浸出粉有助于各种霉菌的生长；葡萄糖提供能源；琼脂是培养基的凝固剂灭菌倒平板后的培养基24小时后未长杂菌为合格培养基，按无菌操作进行。

2.1.1.1 试剂和材料

马铃薯去皮      200g

葡萄糖          20g

琼脂            20g

水              1000mL

2.1.2 种子培养基[6]

2.1.2.1 玉米浆种子培养基

0.2%玉米浆、0.14%硫酸铵、0.03%硫酸镁、0.1%葡萄糖、0.2%磷酸二氢钾，分装3ml在15*150mm的试管中，加塞子，120℃灭菌20分钟