由于 DNA 序列测定的传统方法操作繁琐费时,且需使用放射性同位素作标记[5],已经不 适用于常规分析。各种新的技术不断发展,并逐渐代替传统分析法,其显著改进在于采用了 非放射性的生物素、地谷新配基及荧光染料作标记物。基于荧光信号的测定是目前 DNA 测 定的最准确方法,但所需的仪器昂贵,且难以实现自动化。此外,聚合酶链反应(PCR)也已广 泛用于感染病毒的测定[6-8]。该方法虽具有很高的灵敏度,但需要复杂的样品预处理过程,分 析时间较长,且难以定量测定目标基因。文献综述
目前,许多研究组正在致力于研究高灵敏度便携式快速 DNA 检测器,用以适应生命科 学研究和临床诊断领域的需要。美国加州理工学院的 F。 Kayyem 对当前的 DNA 检测器在诊断 领域的现状作了分析,认为目前的工业技术能够制造高准确度的 DNA 检测器,快速的 DNA 检测器,简便的 DNA 检测器和价廉的 DNA 检测器,但是却还没有研制出集这些优点于一身 的快速准确简便价廉的 DNA 检测器。许多专家认为:最有希望实现这一目标的是生物传感
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器。美国新墨西哥州立大学的 J。 Wang 正将测定血液中铅含量的手提式传感器改进成为检测 DNA 的传感器。法国国家科学研究中心的 F。 Garnier、加拿大 Waterloo 大学的 S。R。 Mikkelsen、 日本 Kyushu 大学的 S。 Takenaka、及德国 Ulm 大学的 P。 Bauerle 等都在致力发展具有创新意义 的 DNA 传感器[9]。目前,采用生物传感器测定 DNA 序列的研究已形成研究热点,吸引了众 多的各国专家和学者投入这一领域[10]。
1。2 核酸的检测方法之电化学检测法
随着近年来科学技术的发展,电分析化学在生命科学领域广泛的应用,我国电分析化学 在生命科学领域已经取得了较大的成绩,主要表现在:(1)电分析化学将传统的动植物载体 有机合成材料材料逐渐向无机合成材料以及天然材料发展,这使得电分析化学在材料的获取 上更加的便捷;(2)在电分析化学中将引进众多的高新技术,例如将纳米技术、基因技术、 溶胶以及凝胶技术等广泛应用到生命科学领域的研究中。能够有效的提高传感器的敏感度和 准确度;(3)在生命科学的发展中,逐渐加快了电化学电子传输媒介的开发,使其传输的种 类迅速蔓延扩大。在进一步深化过程中,将纳米工艺技术融入材料的固定中的酶传感器,能 够模拟人体的微环境,最大程度的提高酶的生物活性,从而使传感器的灵敏度和响应电流逐 渐提高。
在生命科学领域的发展过程中,逐渐应用电分析化学,能够有效的提高电分析化学检测 的灵敏性和准确性,首先,电化学 DNA 传感器在应用过程中,将会由传统的双嵌合剂和三 嵌合剂逐渐改进为单嵌合剂,即在嵌合分子中只有一个基团与 DNA 分子结合,提高了检测 的准确性。其次,电分析化学还将会在电极结构上进行优化,寻求 DNA 在电极表面固定的 新方法,并逐渐发展成为一种稳定的自组装单分子层修饰电极。最后,将电分析化学技术与 其他学科技术紧密结合,互相补充,发展成为检测更敏感、响应更迅捷、操作更方便的电分 析化学传感器,并将其应用到医学领域、食品卫生领域以及环境监测领域,逐渐实现电化学 传感器的微型化、自动化、智能化[9]。
随着科学技术的不断更新,电分析化学在研究过程中将会发生巨大的变化,这使得电分 析化学在生命科学的研究中不仅能够研究人体生命的过程,同时也将成为挖掘生命过程的有 力工具,总之,电分析化学在分析生命科学的演变过程,揭示生命遗传奥秘等研究中发挥着 重要的作用,在电分析化学发展的同时,不仅促进了生命科学领域的发展,而且自身也在不 断进步。