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.4 薄层色谱法[26]、[27]
薄层色谱法具有设备简单、操作方便、分离速度快等特点,然而其
自动化
程度较差,分离是在开放式的固定相上进行,影响分离的因素较多。因此,在分辩率及重现性等方面不如高效液相色谱法和气相色谱法,在较长时间内被作为定性和半定量的手段,但与气相色谱和高效液相色谱法相比也有自己的优点。如固定相是一次性使用,样品的预处理比较简单,对分离物质的性质无特别限制,应用广泛;可同时平行分离多个样品,测试速度快,一次操作所需溶剂量少,选择范围宽,有不同展开方式,有利于不同性质的物质分离;薄层色谱图像可提供原始彩色图像,不仅便于保存原始图像,而且薄层技术可以提供较多信息,直观性、可比性均较好等。郭玉蓉[28]等对荞麦黄酮类物质进行了提取分离,然后对荞麦黄酮提取浓缩液进行薄层分离,得到与芦丁和槲皮素结构相近的两种黄酮类物质,定性显色,结果显示荞麦中的黄酮类物质包括黄酮醇、5-羟基黄酮或2-羟基黄酮等化合物。
.5 荧光分析法
由于黄酮类物质具有平面共扼大分子结构,可与一些金属离子络合,在紫外光照射下有较强的荧光发射,在一定条件下,荧光强度与黄酮类物质的浓度成正比,因此可以通过测定荧光强度进行定量分析。廖声华[29]等利用桑色素和A13+形成二元荧光络合物,在激发波长365nm、发射波长499nm时测定该络合物的发射荧光强度,得出线性方程,并且成功地运用于测定银杏叶中总黄酮的含量,回收率为108.24%和108.77%。张敏[30]等根据黄酮类物质能与Al3+形成稳定的荧光络合物,以芦丁为标样,建立了一种测定银杏叶总黄酮的荧光分光光度法,激发波长436nm、发射波长483nm,测得的平均回收率为99.8%-104.2%,RSD为1.94%。
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