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目前，对苦荞黄酮类物质的抗氧化性评价主要通过体外清除自由基活性评价方法来实现的，具体方法如下：
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1 对2,2-二苯基-1-苦基肼自由基(DPPH•)的清除作用
2,2-二苯基-1-苦基肼(2,2-diphenyl-l-picrylhydrazyl，DPPH•)，是一种人工合成的稳定的以氮为中心的自由基，其结构中含有3个苯环，1个N原子上有1个孤对电子，其乙醇溶液呈紫色，最大吸收波长为517nm。当DPPH•溶液中加入自由基清除剂时，其孤电子配对，吸收消失或减弱，导致溶液颜色变浅，在5l7nm处的吸光度变小，在一定范围内，其变化程度与自由基清除程度呈线性关系，而且这种颜色变浅的程度与配对电子数是成化学计量关系的。22198
AH+DPPH•→DPPH-H+A•
依据DPPH•具有单电子，在517nm处有一强吸收(深紫色)，当自由基清除剂与其单电子配对使其吸收逐渐消失，其褪色程度与其所接受的电子数成定量关系，因而可用分光光度法进行定量分析，从而评价试验样品的抗氧化能力。故该法可用来表征某种物质对自由基的清除能力，通常用清除率表示。清除率越大，表明该物质清除自由基的能力越强。
2 对羟基自由基(•OH)的清除作用论文网
H2O2/Fe2+体系可以通过芬顿(Fenton)反应产生羟基自由基(•OH)。反应的原理为：
Fe2+ + H2O2 → Fe3+ + OH一 + •OH
Fe3+ + H2O2 → Fe2+ + HOO• + H+
HOO• + H2O2 → O2 + H2O + •OH
因为芬顿试剂可以方便地制备羟基自由基，所以被广泛的应用于自由基学的研究和应用领域中。具体试验中，应根据目的和条件的不同，选择不同的体系。常用的有：铁氧化邻二氮菲法、水杨酸法。
1 铁氧化邻二氮菲法
Fenton反应产生•OH，邻二氮菲-Fe2+水溶液因被羟自由基氧化为邻二氮菲-Fe3+，在510nm处的吸光度减小。加入H2O2前加入羟基自由基抑制剂，则Fenton反应产生的羟基自由基被抑制或部分抑制，体系在510nm处的吸光度降低程度相应减小。
2 水杨酸法
Fenton反应产生•OH，羟基自由基氧化水杨酸得到2,3-二羟基苯甲酸，用其在510nm处的吸光值表示•OH的多少，吸光值与•OH的量成正比，反应体系中加入具有清除•OH作用的物质即可降低该吸光值。
3 对超氧阴离子自由基的清除作用
1 邻苯三酚(Pyrogallol，PR)自氧化法
邻苯三酚在碱性条件下迅速自氧化，自氧化过程中产生O2一•，O2一•加速邻苯三酚自氧化速率，同时生成有色中间产物，中间产物的积累在滞后30-45s与时间成良好的线性关系，一般文持4min左右，随后减慢。有色产物在325nm有强烈的光吸收。由于自氧化速率依赖于O2一•的浓度，清除O2一•则抑制自氧化反应，阻止中间产物的积累，从而评价受试物清除O2一•的能力。
2 氯化硝基四氮唑蓝法(Nitro blue tetrazolium，NBT)
采用黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶体系或光照核黄素产生O2一•，超氧阴离子可将NBT还原为蓝紫色物质Formazane，产物稳定且不溶于水。反应式如下：
NBT + O2一• → Formazane + O2
因此，NBT与O2一•作用会有明显的颜色变化。若加入的物质可清除O2一•，降低NBT的还原程度，颜色变化程度将减弱。用分光光度计测定其在560nm的吸光度，以吸光度的变化来间接判断受试物对O2一•的清除作用。