1 引言

番茄（Solanum Lycopersicum）是茄科番茄属的重要经济作物。因为种进化史短、基因 组测序完成、方便在实验中操作等因素，所以是研究肉质果实发育的模式植物。我国番茄主 要品种大多数依靠国外引进的亲本改造或后代分离筛选，自主创新材料比较少[1]。但通过 20 多年的研究和技术攻关，在抗虫、抗病、抗逆、品质、株型、成熟等方面取得了丰硕的成果， 在生物技术应用的某些方面已达到或接近世界先进水平[2]。国内对于番茄果实成熟的研究早 期主要集中在调控果实成熟衰老的相关因子上[3]。来自优Q尔W论E文R网wWw.YouERw.com 加QQ75201.8766

植物病毒载体在植物的基因功能分析基因、病毒基因组的重组位点和重组机制等发挥重 要作用[4]。尽管目前植物病毒载体面临着一些问题，如遗传稳定性、插入外源基因限制、安 全性问题。但因具有许多其他载体无法比拟的优点，不仅越来越广泛地用于生物学基础研究， 也用于有用工业和医药蛋白的开发生产。因此，目前利用植物病毒载体表达外源基因已经成 为生命科学研究领域的热点之一[5]。

植物需不断地调整和适应，使其能在不利的环境条件下存活，因此植物的生长发育受到 高度调控。种子休眠和萌发是高等植物个体发育中的重要事件，关系到种群的生存、繁衍和 分布，具有重要的生态意义。迄今利用大量影响种子休眠和萌发的相关突变体研究中发现， 在种子休眠获得或解除过程中起着关键作用的内源信号分子即植物激素脱落酸(Abscisicacid, ABA)和赤霉素(Gibberellin acid, GA)。许多基于 ABA 和 GA 合成及传导突变体的遗传学研 究表明了这两种激素水平间的平衡以及它们各自的传导途径在调控休眠诱导和维持及促进 种子萌发中起尤为重要的作用[6]。

脱落酸与种子休眠有关,，Abi1、 Abi2、Abi3、 Abi4、 Abi5、 FUS3、 LEC、 MARD 和 CIPK 等基因参与脱落酸的调控过程[7]。蛋白磷酸酶 2C (protein phosphatase 2C, PP2C)基因 家族的成员，包括 ABA 不敏感 I ( ABA-INSENSITIVE1, Abi1)和 Abi2，是中心调控因子, 这 些基因功能的缺失突变引起 ABA 的过敏性反应, 暗示它们是 ABA 信号的负调控因子[8]。

植物钙网织蛋白 CRT 是植物生长中所必需的蛋白，CRT 在所有的分生组织和细胞中有 表达，如根、茎、叶、正在发芽和生长的种子以及不同的花器官中，因此，CRT 在植物生 长和发育中是普遍存在的。CRT 在植物营养生长阶段也是不可缺少的。植物激素，如脱落 酸（ABA）的信号通路在植物的生长、发育和胁迫 CRT 参与的信号通路和激素信号通路可 能存在交叉，这也许是植物响应各种胁迫的主要机制之一。Shaterian 等研究发现，钙离子和 ABA 在植物抗逆中有重要作用，既而指出番茄 CRT 参与 ABA 诱导的抗盐作用，即通过在

基因水平改变 CRT 的表达量，能够在植物抵御胁迫过程中发挥着一定的作用[9]。 本课题利用植物病毒载体——马铃薯病毒 X（potato virus X，PVX）构建脱落酸 ABA

合成相关基因 SlAbi 和 SlCRT 的病毒沉默载体，为后续分析脱落酸 ABA 合成相关基因 SlAbi 和 SlCRT 在番茄果实内种子发育和休眠中的作用奠定基础，将有助于阐明番茄果实内种子 发育和休眠过程中的信号调控网络。论文网

2   实验材料及方法

2。1    实验材料

本研究中所用的实验材料为番茄野生型品种 Ailsa Craig  （AC），由杭师大生科院植物

RNA 信号研究中心提供。

2。2    仪器和设备