分析天平、离心机、水浴锅、PCR 仪、冷冻干燥仪等。
3 实验方法
3。1 实验材料栽培
利用土培法于温度为 25℃,相对湿度 60-70%,光照昼夜循环为 16h 白天/8h 夜晚的人 工气候室种植番茄 AC,以成熟的番茄果实作为抽提总 RNA 的材料,保存于-80 度冰箱。文献综述
3。2 目的基因片段的获得
以上述番茄成熟果实为材料,利用 QIAGEN 公司提供的植物总 RNA 抽提试剂盒抽提总 RNA,并利用北京天根公司提供的反转录试剂盒得到 cDNA。以该 cDNA 为模板,设计基 因特异性引物,通过 RT-PCR 技术扩增目的基因 Abi 和 CRT 的部分基因片段,其中加样体 系和 PCR 扩增体系如下表 1 和表 2 所示。通过琼脂糖凝胶电泳对上述 PCR 产物进行检测, 利用 QIAGEN 割胶回收试剂盒回收正确的目的基因片段。