昆仑雪菊生物活性物质的提取与评价(2)
3.1.5 醇提时间对黄酮提取率的影响 18
3.2 预处理对昆仑雪菊黄酮提取得率的影响 19
3.2.1 颗粒度对黄酮得率的影响 19
3.2.2 浸泡时间对黄酮得率的影响 20
3.2.3 微波超声波辅助对黄酮得率的影响 21
3.3 HPLC分析黄酮组分和含量 22
3.4 提取液的抗氧化能力研究 23
3.4.1 雪菊提取液对DPPH自由基的清除能力 23
3.4.2 雪菊提取液•OH的清除能力 24
4 结论 25
5 展望 26
1 前言
1.1 国内外对黄酮类物质的研究
1.2 黄酮的提取方法
（1） 水提法
水提法适于黄酮甙类物质提取。该法成本低、对环境及人类无毒害、设备简单，适合工业化大生产，但提取率低，提取物中杂质较多（如无机盐、蛋白质、糖类等），后续分离麻烦，现在很少单一使用该法。
（2） 碱性水或碱性稀醇提取法
碱性水或碱性稀醇提取法 黄酮类化合物大多具有酚羟基，易溶于碱水，酸化后又可沉淀析出。其原因一是由于黄酮酚羟基的酸性，二是由于黄酮母核在碱性条件下开环，形成2-羟基查耳酮，极性增大而溶解。因此可用碱性水（碳酸钠、氢氧化钠、氢氧化钙水溶液）或碱性稀醇（50％乙醇）浸出，浸出液经酸化后析出黄酮类化合物。氢氧化钠水溶液的浸出能力高，但杂质较多，不利于纯化。当植物材料（如花和果实）含有较多的果胶，黏液质，鞣质及水溶性杂质时，宜采用石灰水，使它们与氢氧化钙生成钙盐沉淀滤除但浸出效果不如氢氧化钠水溶液好，同时有些黄酮类化合物能与钙结合成不溶性物质被滤除。一般可以根据不同的原料使用不同碱性溶液。
（3） 有机溶剂提取法
根据黄酮类化合物与杂质极性不同来选择适合的有机溶剂，常用乙酸乙酯、丙酮、乙醇、甲醇、水或某些极性较大的混合溶剂如甲醇：水（1：1）进行提取。一般游离甙元，难溶或不溶于水，易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚、丙酮、石油醚等有机溶剂及稀碱液中，黄酮甙类易溶于水、甲醇、乙醇等强极性的溶剂中，故浓度90%-95%的乙醇适宜提取黄酮甙元，60%左右的乙醇适宜提取黄酮甙类。
（4） 微波法
微波法原理是利用磁控管所产生的超高频率的快速震动，使材料内分子间相互碰撞、挤压，利于有效成分的浸出。此法不仅具有反应高效性和强选择性等特点，还具有操作简单、副产物少、产率高及产物易提纯等优点。浸出过程中材料细粉不凝聚、不糊化，克服了热水法易凝聚、糊化的不足。
（5） 论文网酶解法
酶解法对于一些黄酮类物质被细胞壁包围不易提取的原料比较实用。原理是能够充分破坏以纤文素为主的细胞壁结构及其细胞间相连的果胶，使植物中的果胶完全分解成小分子物质，减小提取的传质阻力，使植物中黄酮类物质能够充分地释放出来。
（6） 超临界流体萃取法
超临界流体萃取主要指超临界CO2萃取，该法提取率高，无残留溶剂污染，活性成分和热不稳定成分不易被分解破坏而保持天然特征，可选择性提取和分离纯化，溶剂和溶质分离方便。但该法生产成本高，提取物中烷基酚含量较高，超临界CO2是非极性溶剂，对非极性和分子量很低的极性物质表现出很好的溶解性，但对极性较强的物质溶解能力不足。虽然增大密度能使其溶解能力提高，但增大密度需提高萃取压力，这将使萃取设备的费用显著增加，不适于大规模生产。因此在实际操作中，常常在超临界CO2中加入另一种物质以改变其极性，如从甘草中提取黄酮类化合物，用CO2－水－乙醇溶剂体系可萃取出极性较小的甘草查耳酮，以及极性较大的甘草素和异甘草素。加入的物质被称作夹带剂，也称作提携剂。常用的夹带剂有甲醇、水、乙醇、丙酮、三氯甲烷、乙酸乙酯等。