昆仑雪菊生物活性物质的提取与评价(4)
抗菌作用：英霞等[18]发现，菊花挥发油对金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、变形杆菌、乙型溶血性链球菌、肺炎双球菌均有一定的抑制作用。
抗氧化作用：张而贤等[19]研究了菊花不同提取物的抗氧化活性，结果表明，菊花黄酮类化合物有清除自由基、超氧阴离子的能力，其抗氧化活性与黄酮类化合物含量相关。
抗肿瘤作用：菊花活性成分倍半萜烯内酯对人鼻咽癌CNE2细胞中线粒体功能的影响，发现parthenolide(PN)可明显诱导线粒体功能降低和丢失，提示其与介导肿瘤细胞增殖抑制和毒性效应有关，为鼻咽癌的化学预防提供了依据。
抗诱变作用：菊花对环磷酰胺诱变的小鼠骨髓PCE微核率有明显的抑制作用，平板掺入法实验也证实，菊花对由2一氨基芴诱发的TA98或TAl00菌株的回复突变有明显的抑制作用。
对冠脉的作用：菊花能显著扩张冠状动脉，增加冠脉血流鼍，提高心肌对缺氧的耐受力。杨学远等发现，杭白菊制剂的酚性部分可以增加豚鼠离体心脏冠脉流量，并对家兔的心、肝、肾功能无明显毒性作用。菊花对实验性心肌梗塞、实验性冠脉粥样硬化或供血不足的实验动物，能增加血流量和营养性血流量，还有加强心肌收缩的作用。
1.5 菊花中黄酮的研究现状
1.5.1 菊花中黄酮的提取
热水提法：此法较简单，提取过程中需考虑加水量、浸泡时间、煎煮时间及次数等因素的影响，成本低且安全，适合于工业生产，缺点是提取出的杂质较多，提取率较低。
醇提法：多用乙醇或甲醇作提取溶剂，提取2～3次。可用冷浸法和刨流法，冷浸法不需加热，但提取时间长，效率低；回流法最为常用，效率较前者高。
超声波法：其原理是利用超声波的作用，加速有效成分的浸出[20]。另外，超声波的次级效应如机械振动、乳化、扩散、击碎、化学效应等也能加速成分的扩散释放，并充分与溶剂混合，利于提取[21]。
微波法：是利用微波能进行物质萃取的新技术，可应用于黄酮类物质提取，可获得较高的萃取效率以及较好的萃取质量，具有选择性强、重现性好、节省时间、节省溶剂、节能、污染小等优点[22]。
1.5.2 菊花中黄酮的分离纯化方法
分离纯化多用大孔吸附树脂法。大孔树脂吸附技术近年来在我国已广泛用于中草药有效成分的提取、分离、纯化工作中，该法吸附容量大、再生简单，适用于大规模生产；所得提取物体积小、不吸潮，特别适用于颗粒剂、胶囊剂和片剂。高效液相色谱法分离效果理想，但成本相对较高，多用于定性监测、定量分析或少量样品的制备。
1.6 有效成分的功效评价
1.6.1 DPPH 自由基清除能力
自由基是生命活动过程中生物化学反应的中间产物。在正常情况下，机体内自由基的产生和清除处于动态平衡之中，但它若在体内产生过多或清除过慢，就会在分子水平、细胞水平以及器官水平给机体造成损伤，并可加快机体的衰老过程。
测定DPPH为含有奇数电子的稳定自由基，其原理是利用其甲醇溶液在517 nm可见光下具有极强的吸光度，但当其与任一自由基结合或被抗氧化剂还原时，其吸光度会下降；吸光度越低，表示样品清除DPPH的能力越强。
1.6.2 对•OH的清除作用
羟自由基是体内最强的活性氧，人体内没有专一的酶防御系统来抵制羟自由基。本文利用Fenton反应产生的羟自由基，攻击脱氧核糖，如果样品具有亚铁离子螯合能力，可以通过螯合Fe2+抑制Fenton反应的发生来保护脱氧核糖，而非直接与自由基反应引。
Fenton法：H2O2在Fe2+的催化作用下分解产生•OH,其氧化电位达到2.8V,它通过电子转移等途径将有机物氧化分解成小分子。同时,Fe2+被氧化成Fe3+产生混凝沉淀,去除大量有机物。可见,Fenton试剂在水处理中具有氧化和混凝两种作用。Fenton试剂在黑暗中就能降解有机物,节省了设备投资,缺点是H2O2的利用率不高,不能充分矿化有机物。研究表明,利用Fe3+、Mn2+等均相催化剂和铁粉、石墨、铁、锰的氧化矿物等非均相催化剂同样可使H2O2分解产生•OH，因其反应基本过程与Fenton试剂类似而称之为类Fenton体系。如用Fe3+代替Fe2+,由于Fe2+是即时产生的,减少了•OH被Fe2+还原的机会,可提高•OH的利用效率。若在Fenton体系中加入某些络合剂(如C2O2-4、EDTA等),可增加对有机物的去除率。