PB实验测定的结果见表4-1,关键因素的选择是采用Design expert8.0.5进行对PB设计数据进行分析,并进行逐步回归分析,得到回归分析方程为:辅酶总含量=6.10834-1.32442*B+0.43977*D+0.40958*E。回归分析显著性分析,总体显著性分析为差异性显著。当Prob > F<0.05时说明因素影响显著, Prob > F<0.01 说明影响高度显著。从表4-1可以看出提取液的加入量(B)、震荡次数(D)这 2 个因素的Prob > F均小于0.05所以对酵母内辅因子NADH/NAD+的提取率影响显著,而超声时间(E)的Prob > F<0.01则对酵母内辅因子NADH/NAD+的提取率影响高度显著。因此选择提取液加入量、震荡次数和超声时间作为显著因素,进行进一步响应面的设计和分析。

4.3响应面结果分析
将响应面数据进行回归分析,回归分析结果见表4-2,对响应值与各因素进行回归拟合后,模型表达式如式(1)所示。

表4-2 回归系数显著性检验表
Table 3  The significance test of regression coefficients
来源    自由度    均方    F值    P值
模型    9    0.52    56.26    < 0.0001**
A-震荡次数    1    0.065    6.98    0.0334*
B-超声时间    1    0.72    77.56    < 0.0001**
C-加入提取液量    1    0.54    58.19    0.0001**
AB    1    0.11    11.72    0.0111*
AC    1    0.2    21.8    0.0023**
BC    1    0.15    16.4    0.0049**
A^2    1    0.44    47.46    0.0002**
B^2    1    1.43    154.3    < 0.0001**
C^2    1    0.75    81.27    < 0.0001**
注:*为p<0.05;**为p<0.01。
辅酶总含量=2.13+0.090*A+0.30*B-0.26*C-0.17*A*B-0.23*A*C+0.20* B*C-0.32* A2-0.58* B2-0.42* C2
P水平是检验回归系数的标准,当p<0.05时表明回归方程显著;p<0.01时表明回归方程高度显著;当p >0.05时表明回归方程不显著。从表4-2可以看出各项的p值均小于0.05,均达到了显著水平。其中回归模型高度显著,R2为 0.9864,由此可说明模型的拟合度较好。
从表4-2可以得出,当p<0.05时,模型中的编码变量对指标的影响显著;p<0.01S时高度显著。震荡次数(A)、超声时间(B)、加入提取液的量(C)对酵母中辅酶NADH/NAD+的提取率有显著的影响,而其中超声时间(B)的p<0.01对响应值酵母中辅酶NADH/NAD+的提取率有高度显著的影响。同时可以从表4-2可以得出,震荡次数(A)与超声时间(B)之间的交互作用高度显著而震荡次数(A)和加入提取液的量(C)、超声时间(B)和加入提取液的量(C)之间有交互作用。从整体分析,模型的p<0.05,说明模型在概率а=0.05水平上能够拟合试验数据,置信区间95%。
响应曲面反映了当震荡次数、超声时间、加入提取液的量三个因素的任意两个变量取零点水平的时候,其它两个因素的交互作用对酵母内辅酶NADH/NAD+的提取率的影响情况。曲面陡表明该因素对提取率的影响显著,曲面平缓表明该因素对提取率的影响不显著;等高线的形状反映两因素交互作用的强弱,椭圆形表明交互作用强,影响显著,圆形则相反;等高线密集表明对提取率影响较大,稀疏表明影响较小。
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